MCT-1 作为弥漫性大B细胞淋巴瘤治疗靶点及机制研究

Oncogene MCT-1(Multiple copies in T-cell lymphoma-1) stimulates cell proliferation, suppresses apoptosis, promotes angiogenesis and modulates the translation of cancer-related genes. In vitro studies supported its role in lymphomagenesis. However, it has not been testified in vivo. In this study, we will establish a MCT-1 transgenic mouse model to investigate the role of MCT-1 and its molecular mechanism in lymphomagenesis. Meanwhile, RIP-CHIP assay will be used to globally study the mRNAs modulated by MCT-1 in Diffuse Large B-cell Lymphoma (DLBCL). Moreover, our recent data have shown that MCT-1 is elevated in the majority of human DLBCL samples and knocking down MCT-1 by shRNA induces apoptosis in DLBCL cells, supporting its value as a potential therapeutic target for DLBCL. A specific MCT-1 inhibitor will be designed to disrupt MCT-1 function. The therapeutic effect of the MCT-1 peptide inhibitor will be investigated in cell culture system and mouse xenograft models. This study will provide important evidence and a new approach for DLBCL treatment.

癌基因MCT-1 (Multiple copies in T-cell lymphoma-1)与淋巴瘤的发病密切相关。体外实验显示，MCT-1具有抑制细胞凋亡，提高细胞增殖和促进血管生成等多方面的功能，但是，尚未通过体内实验证实。本研究将建立 MCT-1转基因小鼠模型，并用该模型研究MCT-1在淋巴瘤发病中的作用和分子机制。同时，利用RIP-CHIP技术系统研究MCT-1在弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中翻译水平上的调控。此外，我们最近的实验结果表明，MCT-1在人类绝大多数的DLBCL中高表达，基因敲除掉MCT-1诱导了细胞凋亡。这提示MCT-1可能是DLBCL新的治疗靶点。本研究将设计MCT-1特异的抑制剂来阻断MCT-1的功能，然后利用细胞和小鼠肿瘤异体移植模型探讨其对DLBCL的治疗效果和毒副作用。我们的研究结果将为DLBCL的治疗提供重要的理论依据和新的有效途径。

弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）恶性度高，目前尚不可治愈。因此，寻找新的更有效的治疗靶点和药物是DLBCL研究领域的热点。MCT-1(Multiple copies in T-cell lymphoma-1)是一种在T淋巴瘤细胞中发现的癌基因并且在绝大多数DLBCL细胞中高表达，与DLBCL发病有密切关系。有文献表明PKC抑制剂能抑制DLBCL的生长，但PKC与MCT-1之间的关系在DLBCL中的作用尚无报道，本研究旨在探讨在DLBCL中MCT-1与PKC之间的关系。首先，我们应用siRNA技术干扰了PKC后发现MCT-1的mRNA和蛋白质表达在DLBCL细胞系SUDHL-4、NUDUL-1以及OCI-LY8细胞中是明显下调的。我们通过pan-PKC的抑制剂Sotrastaurin（SOT）探讨其在DLBCL中对PKC以及MCT-1表达的影响，我们发现SOT能明显抑制SUDHL-4、NUDUL-1以及OCI-LY8这三种细胞的增殖；此外我们也发现，SOT能明显促进这三种细胞的凋亡；细胞经过SOT处理后，其线粒体膜电位是明显下降的。机制研究结果显示: 与对照组对比，经SOT处理后的活化的Caspase 3和活化的Caspase 8的表达水平明显上升，总的Caspase 9表达水平降低，而活化的Caspase 9则升高。其中MCT-1、PKC和磷酸化的AKT经过SOT处理后的表达水平相较于对照组明显下降。由此可知，经SOT处理后，DLBCL细胞中其MCT-1的表达是明显降低的，且这种下调很有可能是通过激活经典的caspase凋亡通路以及下调AKT的活化通路完成的。动物体内成瘤实验表明：SOT能明显抑制裸鼠肿瘤的增长。结论：PKC抑制剂是通过降低癌基因MCT-1的表达从而抑制DLBCL的生长，我们的研究为DLBCL的治疗提供了重要的理论依据，明确 MCT-1 可作为治疗 DLBCL 的新的药物靶点。