哺乳动物卵母细胞化学辅助去核及极性形成机理的研究

尽管已出生了多种克隆动物，但克隆技术的成功率很低；改进克隆技术各环节是当前的研究重点。综合分析各种卵母细胞去核方法发现，化学辅助去核具有去核彻底和去掉胞质量少等优点，是最有前途的去核方法。另外，化学诱导卵胞质突起的形成还是研究细胞极性形成的好模型。然而，目前关于化学辅助去核研究很少，机理还不清楚，有许多问题亟待解决。本项目将首先建立不同动物卵母细胞的最佳化学辅助去核方案；研究卵龄、卵质量及Ca2＋等因素对化学辅助去核的影响；确定化学辅助去核的效率，去核后MPF/MAPK活性变化，纺锤体相关蛋白（NuMA等）的丢失情况以及克隆胚的发育能力。然后，通过研究诱导卵胞质突起形成过程中不同微管抑制剂的作用性质、不同动物卵母细胞微丝与皮质的连接方式、微管抑制剂和稳定剂的作用比较、微管与微丝的相互作用以及染色质与微管的相互作用，探讨哺乳动物卵母细胞化学辅助去核及极性形成的机理。