利用转导自身免疫调节因子(AIRE)的骨髓DCs细胞诱导免疫耐受的实验研究

Autoimmune regualtor (AIRE) participates in immune tolerance by regulating the expressions of tissue restricted antigens (TRAs) in thymus. Therefore, we suppose that if the immune tolerance could be induced by exploring the resonable, effective approach that AIRE is transduced into bone marrow dendritic cells (DCs) and plays its function as thymus. The study include:1. The effects of AIRE on the expressions of TRAs will be observed in vivo and in vitro by tansducing AIRE into DCs with gene transduction technique.2. The establishment of the immune tolerance induced through regulating TRAs by AIRE will be evaluated by occurrence of diabetes in recipient NOD mice that are transplanted by AIRE transduced bone marrow DCs.3. The mechanisms of AIRE in inducing immune tolerance by regulating TRAs will be explored by analyzing the deletion of autoreactive T cells and generation of Treg. To establish artifical approach of immune tolerance has important biological significance and clinical application value for prevention and treatment of autoimmune disease, transplantation rejection, allergic reation and so on.

自身免疫调节因子（autoimmune regulator，AIRE）具有调控胸腺内组织限制性抗原（tissue restricted antigens，TRAs）表达，诱导免疫耐受的功能。因此，本课题设想将AIRE转导至骨髓DCs细胞中，模拟其在胸腺中的作用，探索合理、有效诱导自身免疫耐受的方式。 研究内容包括:1.采用基因转导技术将AIRE转导至DCs，体内外观察AIRE对DCs细胞TRAs表达调控的影响；2.利用AIRE转导的骨髓DCs细胞移植，观察对受者NOD鼠糖尿病发生的影响，评估AIRE通过调控TRAs表达诱导免疫耐受的效果；3.通过体外和体内两方面分析AIRE调控TRAs对自身反应性T细胞清除和Treg细胞产生的影响，探究AIRE通过调控TRAs诱导免疫耐受的机制。 人工诱导免疫耐受方式的建立对防治自身免疫病、移植排斥反应、过敏反应等具有重要的生物学意义和临床应用价值。

自身免疫调节因子（autoimmune regulator，Aire）具有调控胸腺内组织限制性抗原（tissue restricted antigens，TRAs）表达，诱导免疫耐受的功能。因此，本项目以基因操纵和骨髓细胞移植技术相结合为手段，将Aire转导至骨髓细胞中，通过移植转导了Aire的骨髓细胞至自身免疫糖尿病小鼠模型（NOD鼠），观察其对TRAs表达的影响及对自身免疫病的预防和治疗作用，探究其诱导耐受的机制，建立合理、有效诱导自身免疫耐受的方式,为自身免疫病的防治提供新思路，新方法。对防治自身免疫病、移植排斥反应、过敏反应等具有重要的生物学意义和临床应用价值。..研究内容包括:1.Aire过表达骨髓DCs（BMDCs）细胞模型的建立。通过构建Aire过表达慢病毒载体，成功建立效率达80-90% Aire过表达的BMDCs（Aire-BMDCs）。2.Aire对BMDCs耐受相关分子和TRAs表达的影响。研究显示Aire可维持BMDCs中共刺激分子及MHC-II低水平表达，并促进TRAs的表达。3.移植过表达Aire的BMDCs对1型糖尿病的影响。研究表明表达Aire的BMDCs对NOD鼠T1D发生的预防和作用。4．AIRE转导的骨髓DCs细胞诱导免疫耐受的机制分析。Aire-BMDCs可能通过促进NOD鼠体内Th2和Treg的产生，抑制Th1，Th17和Tfh的产生来维持免疫耐受；同时，可促进NOD鼠中自身反应性CD4+T细胞的凋亡，进而保护胰岛细胞，防止疾病的发生。