套袋‘苹果梨’果实着色关键酶的基因克隆与表达特性研究

苹果梨做为吉林省特产，不仅是抗寒的优良的品种，也是能够着色的特殊优良品种，前人研究发现它同时具有白梨、砂梨和秋子梨的血缘，特别是其果实能全面着色，在白梨、砂梨中实属罕见。目前，除了杨长红等在"基于PCR-RFLP梨品种cpDNA遗传多态性的分析"中有苹果梨的报道外，在分子生物学方面对苹果梨的研究报道很少。因此本项目以苹果梨果实为试材，在基因组水平和转录水平克隆苹果梨花青苷途径相关基因（主要克隆PAL、CHI、UFGT、CHS、ANS、F3H等基因）的cDNA和全长，研究克隆基因的表达特性，并且根据获得的全长序列进行相关的生物信息学分析，从分子生物学角度探讨苹果梨果实着色的生理机制，为进一步探明梨果实着色的分子机理提供理论依据，进而能够为通过转基因等手段获得适合生产栽培的红色梨新品种奠定理论基础。

苹果梨（Pyrus bretschneideri Rehd.‘Pingguoli’）属于蔷薇科梨属植物，最初由朝鲜引入我国延边地区，因其具有果大、抗寒、果皮阳面着红晕、口感甘甜、酥脆、多汁等诸多优点，在市场上受到广泛青睐，具有很高的经济价值。近年来，红皮梨得到了越来越多的消费者的追捧。因此开发红梨资源，培育红梨新品种成为我国梨树育种研究的重要方向。. 目前，课题组在套袋苹果梨解袋前后果皮着色相关基因研究方面已经取得了很多成绩，已经对对套袋苹果梨果实着色关键酶PAL、CHI、UFGT基因片段和PAL、CHS、DFR、ANS、CHI、F3H基因以及转录基因MYB114全长进行克隆，并对其相关生物信息学特性进行了分析。应用实时荧光定量PCR技术对‘苹果梨’果皮花色素苷合成相关基因PAL、CHI、UFGT、CHS、DFR、F3H、ANS、MYB114在不同处理的不同取样时期果皮中的表达模式进行了分析。结果显示：套袋‘苹果梨’果实解袋着色过程中以上基因的表达水平与花色素苷含量变化关系密切，表明已克隆成功的基因在‘苹果梨’果皮花色素苷的积累的过程中起着重要的作用，进而影响‘苹果梨’果实色泽的形成。为进一步从分子水平上研究‘苹果梨’果实着色的生理机制，培育具有自然着色功能的‘苹果梨’红色新品种（系）提供理论依据。.