血浆miRNA作为生物标志物在乳腺癌早期诊断中的应用基础研究

自从2008年中美学者发现血浆miRNA以来，血浆miRNA作为肿瘤诊断、治疗和预后的潜在生物标志物备受关注。血浆miRNA具有含量丰富、性质稳定、易于检测等特征，有望作为一类新型生物标志物用于乳腺癌等肿瘤的早期诊断和筛查。课题组前期依托TaqMan低密度芯片平台系统构建和筛选了乳腺癌特异的血浆miRNA谱，本课题将在此基础上，进行独立验证和交叉验证以筛选和优化乳腺癌诊断血浆miRNA生物标志物；通过已经建立的江苏常州地区自然人群队列，评价血浆miRNA在乳腺癌早期诊断中的应用价值；应用分子生物学手段探讨相关miRNA发生和作用机制。本课题为临床转化医学研究，其顺利实施有助于建立乳腺癌血浆miRNA表达谱数据库，获得可能用于乳腺癌早期诊断和筛查的血浆miRNA生物标志物，初步阐明相关miRNA在乳腺癌发生中的生物学机制，为确定简单易行价廉的乳腺癌早期诊断和筛查生物标志物提供理论和技术基础。

本研究按照计划书要求，依托Solexa测序和TaqMan低密度芯片平台 (TLDA)检测系统，通过单样本验证和扩大验证后，获得了4个乳腺癌诊断miRNA标志物，并且发现该血浆miRNA谱具有较高的乳腺癌诊断价值。此外，还通过项目所收集的乳腺癌新发病例，结合随访信息，基于TLDA芯片和qRT-PCR的方法，进一步在预后较差组（死亡病例）与预后较好组（存活病例）中研究了血浆miRNA作为生物标志物预测乳腺癌预后的价值。通过本项目收集的人群样本，课题组还对miRNA 合成通路上多个基因、miRNA 靶基因上多态位点与乳腺癌发病风险进行了关联分析和可能的生物学机制探讨，并且对GWAS报道的与乳腺癌发病相关的多个区域进行了直接验证和精细作图研究；此外还对多个重要生物学通路（自噬通路、tRNA合成酶通路、剪切通路Ser-Arg 和hnRNP蛋白家族）相关基因多态性与乳腺癌的关联进行探讨，发现了多个遗传变异与乳腺癌的发病风险有关。研究结果对于建立乳腺癌血浆miRNA表达谱数据库，获得可能用于乳腺癌早期诊断和筛查的血浆miRNA生物标志物具有一定的指导意义，初步阐明的多个乳腺癌易感标志物可用于高危人群的筛查和风险评估。