血浆、尿液microRNAs在急性肾损伤早期诊断中的应用基础研究

急性肾损伤（acute kidney injury AKI）发病率逐年增加，死亡率高，其早期诊断对于治疗和预后至关重要，发现其早期敏感特异的标志物一直是肾脏病领域的研究热点。前期AKI的标志物研究集中在蛋白组学，最近发现成熟microRNAs能稳定存在于血浆及尿液中，具有理想标志物的某些特征。本研究在前期成功分离microRNA微泡的基础上，拟运用miRNA芯片、定量PCR、免疫印迹、病理染色、流式细胞术等方法，从人肾小管上皮特异miRs的角度出发，结合血浆miRs芯片，在AKI细胞模型、动物模型，以及临床患者中全面分析血浆、尿液特异miRs作为AKI早期损伤阶段的新的分子标志物，并初步探讨其存在形式，期待发现一种全新的AKI早期筛查的分子标志物。

急性肾损伤是临床常见的急危重症，早期诊断给予早期治疗至关重要，microRNA由于能在血清及尿液中稳定存在而成为良好标志物，本研究立足寻找AKI早期有效标志物而开展，总体进展顺利，也得到美国乔治亚大学肾脏病中心的通力合作。首先利用探针法更高效可靠的建立了稳定的血清、尿液microRNA检测平台。其次制备了急性肾缺血再灌注损伤的动物模型，利用动物模型的肾组织以及血清尿液挑选出5个候选microRNAs，分别是miR-17-3p、miR-687、miR-668、miR-463和miR-379。在肾脏科挑选急性肾损伤患者肾穿组织对候选标志物进行检测，发现与对照组相比miR-17-3p、miR-687、miR-668有显著的高表达，而血清和尿液的候选microRNA并无表达差异性。后又在长海医院选取胸心外科行心脏手术且经历体外循环的患者上百例，依据AKIN标准，挑选出急性肾损伤患者和对照组，对其0、3、6、9、12、24、48小时的血清及其尿液进行候选microRNAs 的检测，发现mir-668在AKI患者尿液中3小时内就显著的升高了，选取有效的统计方法，ROC曲线下面积达0.7以上，诊断效率尚可，可成为良好的生物标记物。本研究发表基金标注论文10篇，获实用新型授权专利2项，一篇全国会议学术交流，培养1名硕士研究生毕业。