补骨脂素和异补骨脂素通过雌激素膜受体调节儿茶酚胺分泌合成的作用机制

持续的儿茶酚胺分泌增多可诱发血压升高、AS、加重心衰等心血管系统的异常。而由雌激素膜受体（mER）介导的非基因组效应 在调节儿茶酚胺分泌及合成中发挥重要作用。补骨脂近来发现有较强的心血管活性，但其作用途径与机理与常识迥异，本研究在以往工作基础上，探讨其经儿茶酚胺作用机制。采用牛肾上腺髓质细胞模型，观察补骨脂的植物雌激素成分补骨脂素和异补骨脂素通过雌激素膜受体对茶酚胺类神经递质合成、分泌以及对调节合成的限速酶酪氨酸羟化酶的活性、磷酸化的影响；利用调节儿茶酚胺类神经递质合成、分泌各种信号传导通路中关键节点PKA、PKC、Erk及p38阻滞剂，探索经由膜受体影响酪氨酸羟化酶及CA合成的通路；利用转染ER大鼠PC12细胞揭示补骨脂素和异补骨脂素对雌激素膜受体亚型的选择性，阐明确补骨脂素、异补骨脂素对CA合成、分泌调节信号通路和作用靶点及作用机制，为含植物雌激素中药在临床的应用提供科学依据。

儿茶酚胺（CA）是机体维持正常生命活动的内源性物质，是体内重要的神经递质，太过和不及均会造成病理性损伤。研究药物干预CA的合成与分泌及药物作用的分子机制对筛选及研发中药新药，提高药物临床疗效等具有重要意义。前期工作显示补骨脂提取物异补骨脂素和补骨脂酚具有较强的植物雌激素样活性。而以往报道植物雌激素对CA的合成、分泌和代谢均有调节作用。因此，本课题以牛肾上腺髓质细胞为拟交感模型，以异补骨脂素和补骨脂酚调节CA分泌和合成为切入点，以影响CA分泌及合成的多种因素为指标，从细胞层面上阐明异补骨脂素和补骨脂酚对CA分泌调节的作用及分子机制。研究表明，异补骨脂素能够通过P/Q电压依赖性钙离子通道和α4β2和α7烟碱型乙酰胆碱受体抑制不同刺激剂引起的儿茶酚胺分泌，异补骨脂素能抑制CA合成限速酶酪氨酸羟化酶（TH） ser19，31，和40磷酸化而降低TH活性而影响CA合成。补骨脂酚对CA分泌具有双向作用，补骨脂酚能够通过活化雌激素受体通路及JNK信号通路促进CA分泌，也能够通过抑制抑制细胞内钙离子浓度能减少刺激剂诱导的CA分泌。补骨脂酚能够通过PKA 和 ERK1/2信号通路促进THser40和31磷酸化进而影响CA分泌。同时，补骨脂酚能够抑制应激引起的NE和E含量增加作用，能够降低小鼠在强迫游泳和悬尾实验中的不动时间，提示补骨脂酚对应激小鼠具有保护作用，补骨脂酚有抗应激的作用以及潜在抗抑郁的效应。上述结果说明异补骨脂素和补骨脂酚具有降低应激后交感活性的作用, 异补骨脂素和补骨脂酚可以应用于缓解应激损伤或心血管系统疾病等;补骨脂酚可能具有潜在的抗抑郁的作用.本研究发表论文4篇，1篇SCI文章，3篇中文核心期刊，培养博士生1名，研究生1名。