苏云金芽胞杆菌、昆虫肠道及其共生菌三者协同增效作用机制

苏云金芽胞杆菌杀虫剂和转Bt抗虫作物已在害虫防治中发挥了重要作用，至于它的杀虫机制提出了有多种模型和假说，最近PNAS上提出了新理论，苏云金芽胞杆菌对舞毒蛾（gypsymoth）的杀虫活性需要肠道共生菌，其作用机制尚不清楚。在课题长期从事苏云金芽胞杆菌研究的基础上，本研究以人工饲料喂养的棉铃虫和小菜蛾为供试昆虫，分离和筛选两种虫的肠道增效共生菌,筛选能清除增效共生菌、对试虫生长和对杀虫蛋白活性无影响的抗生素。建立无肠道共生菌试虫品系，将Cry1Ac10蛋白+抗生素，加入和不加入增效共生菌到人工饲料，喂饲两类试虫，取感染三个阶段的试虫的中肠，用流式细胞仪检测GFP标记共生菌，用不同显微镜观察上皮细胞表面和内部的变化，测定BBMV与荧光分子Cy5标记的抗Cry1Ac10抗体的结合能力，分析共生菌、昆虫肠道和Cry蛋白三者各自的增效作用，确定其真正的杀虫机制。