苏云金芽胞杆菌中伴胞晶体与芽胞粘连的分子机制

苏苏云金芽胞杆菌在芽胞形成过程中可形成具有杀虫活性的伴胞晶体，大多数菌株的伴胞晶体是在母细胞中形成的，在空间上与芽胞彼此相互独立。而个别菌株的伴胞晶体在芽胞外壁内侧形成，在芽胞成熟后与芽胞总是粘连在一起，产生晶胞粘连现象。本课题将以YBT-020菌株为材料，从考察启动子特性和寻找协助蛋白两方面来探索晶胞粘连现象的分子机制。为此，将克隆该菌株的伴胞晶体蛋白基因，分析启动子的表达性质，将该基因与典型杀虫晶体蛋白基因互换启动子，检测杂合基因的表达以及在形成晶胞粘连现象中的作用；利用改造的穿梭型BAC载体，构建该菌株的BAC文库，将重组BAC质粒转移到该菌株的晶体蛋白基因敲除突变株中，筛选晶胞粘连的重组子，通过亚克隆寻找控制晶胞粘连的最小基因片段,从而找到控制晶胞粘连的关键遗传因子。该机理的揭示可为构建在芽胞外壁内侧表达杀虫晶体蛋白基因的工程菌以及构建新型"生物囊"杀虫工程菌提供理论基础。