苏云金芽胞杆菌产生的杀虫晶体蛋白(ICPs)占菌体总蛋白20-40%,形成的伴胞晶体又十分稳定,它成为产量最大的微生物杀虫剂,而ICPs基因又广泛用于转基因抗虫植物。本研究在对专利菌株YBT1520大量研究和应用以及全基因组测序的基础上,构建出转座子Tn916多位点插入突变库,筛选伴胞晶体明显变异和缺失的突变株,将它们的总蛋白进行二维电泳,确定差异表达蛋白。经质谱分析及数据库查询确定已知蛋白功能,对未知功能蛋白借助全基因组序列进行分析,揭示与ICPs大量表达以及与伴胞晶体形成密切相关的一系列蛋白,找出编码相关蛋白的基因,并将其敲除,验证这些基因与ICPs大量表达和伴胞晶体形成之间的关系。依此构建出ICPs基因大量表达和伴胞晶体形成的调控模型及影响因子的网络图,首次用基因组和蛋白质组学方法在理论上阐明它们形成的分子机制,为ICPs及其它在医学和工业上重要蛋白基因的大量表达和稳定形成奠定基础。
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数据更新时间:2023-05-31
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