CISH基因在人T淋巴细胞分化及抗结核感染中的免疫调节机制研究

Many lines of evidence support an important role of host gene in TB susceptibility and development. CISH (cytokine-inducible SRC homology 2 domain protein) is encoded by the gene called CISH, located at 3p21.3. CISH is a member of the suppressor of cytokine signaling (SOCS) family, which controls the negative feedback of the host immune response. Some researchers have appointed that CISH is critical for T-cell proliferation and survival in response to infection. Therefore, in order to identify the genetic factors of CISH contributing to active TB, the constructed naive CD4+T cell with CISH over-expressing was induced to differentiation, and then the cells was infected with mycobacterium. This study will evaluate the effect of CISH express level on the differentiation and activation of T lymphocyte before and after the infection. Thus, the results of our research will draw a new picture of the host cellular immune response.

明确宿主结核病易感基因与结核病发生发展的关系，是结核病控制领域中研究的重点问题。CISH基因编码的细胞因子诱导的SH2蛋白是细胞因子信号转导负调控蛋白家族的主要成分，因此在调节机体抗结核感染的免疫应答中具有重要的作用。为了进一步明确CISH基因对T淋巴细胞分化以及抗结核感染过程中的免疫调节作用，本项目拟通过构建CISH基因过表达的幼稚T细胞模型，建立CISH基因表达异常的细胞模型，通过对其定向诱导分化，明确CISH基因表达量的改变对T淋巴细胞分化效率的影响；通过对表达异常的幼稚T细胞模型进行结核分枝杆菌攻击实验，明确CISH基因在抗结核感染过程中调节T细胞活化及启动抗炎性免疫应答中的作用机制。该项目将从功能学角度对CISH基因在抗结核感染的过程中的免疫调控作用进行深入全面探究，并可为机体细胞免疫应答研究提供新的数据和理论依据。

CISH是细胞因子信号转导负调控蛋白家族的主要成分，深刻了解结核分枝杆菌与宿主免疫细胞的相互作用，明确CISH基因功能与结核病发生发展的关系，是结核病控制领域中研究的重点和难点问题。因此，本研究分别从基因的转录活性、RNA表达量、细胞因子通路等角度展开分析，初步探讨CISH基因启动子区SNP改变在中国汉族人群抗结核免疫应答中的作用机制，及其在结核病发生发展中的作用。双萤光素酶报告基因分析系统测量发现结核病易感的CTC单体型其启动子活性显著低于GAC单体型启动子的活性；外周血淋巴细胞经IL-2刺激后，CISH基因mRNA表达相对量在携带有结核病易感的基因型儿童中显著低于其他基因型个体；通过对人群中CISH基因启动子区不同等位基因携带者的细胞因子表达情况研究，发现SNP变异可使IL-12p40和IL-10细胞因子的分泌增加；因此本研究推测CISH基因启动子区多态性应该是通过特定的机制对细胞因子和细胞亚群进行了调控，某种程度上发挥了类似CISH基因敲低的生物学效应，进而参与了结核病的发病。本研究从基因水平和细胞因子水平两方面揭示CISH基因启动子区多态性对机体抗结核免疫功能的影响，为揭示该基因对机体免疫细胞抗结核的免疫调控机制奠定基础。