细菌群体感应信号降解酶基因的克隆及降解机制解析

群体感应(Quorum Sensing，QS)是许多植物病原细菌致病基因表达的重要调控机制，破坏病原细菌QS系统的功能是防治植物细菌病害的一种新途径。本研究室已从土壤中筛选得到大量具有QS信号分子降解酶活性的细菌菌株。本项目利用分子遗传学手段，通过随机突变结合PCR克隆，或构建基因组粘粒文库进行异源表达的方法克隆高活性细菌菌株中的QS信号降解酶基因。对克隆所得基因进行原核表达和蛋白纯化。离体条件下将纯蛋白与不同信号底物反应，通过对产物的质谱和核磁共振分析，确定QS信号降解酶的生化机制。同时，以欧文氏菌软腐病和细菌性青枯病为靶标检测QS信号降解酶转化病原细菌后对致病性的影响，以及QS降解酶产生菌和转基因生防工程菌对植物细菌病害的防治效果。该项目从破坏植物病原细菌致病性调控机制的角度出发，为病害生物防治和将来抗病转基因植物研究积累新的遗传材料。