VHL介导的HIF信号通路对KSHV相关肿瘤恶性行为的影响

卡波济氏肉瘤是一种恶性血管性皮肤肿瘤，常发生于皮下组织或粘膜，是发生于艾滋病患者中的最常见恶性肿瘤。卡波济氏肉瘤相关疱疹病毒（KSHV)是如何通过所谓的免疫规避策略抑制机体的免疫应答、引起癌细胞生长的分子机理，并研发高效治疗性疫苗，成为了国内外迫切的研究任务。目前大量数据表明了瘤内缺氧环境易造成肿瘤细胞的转移和抗肿瘤治疗，由KSHV诱发的多种恶性肿瘤组织中同样发现存在缺氧现象。但对于KSHV相关肿瘤细胞如何特异应答缺氧环境和调节抑癌蛋白VHL 介导HIF 缺氧信号通路尚未清楚.我们拟以KSHV 感染和非感染不同肿瘤细胞为模型，在正常和缺氧条件下，综合探讨KSHV 病毒在基因表达和翻译后蛋白修饰水平介导信号通路的特异调节，并在体内外分析VHL 的缺氧和非缺氧依赖信号途径激活对肿瘤细胞存活和生长的影响,探讨修复VHL 信号通路来改善肿瘤内缺氧微环境，对治疗性蛋白疫苗的杀伤效果的影响。

卡波济肉瘤是艾滋病患者中最常见的恶性肿瘤。1994 年在艾滋病患者体内的卡波济肉瘤组织中分离出波济肉瘤相关疱疹病毒（KSHV），该病毒属于嗜淋巴细胞性γ -2 单纯疱疹病毒。除卡波济肉瘤外，KSHV 还能引起两种淋巴细胞增生性疾病，分别为原发溢出性淋巴瘤（又称为体腔淋巴瘤）和多中心性Castleman’s 病，表明该病毒可以引起多种B 细胞系淋巴瘤。与其它疱疹病毒一样，KSHV 存在潜伏感染和溶解感染两个不同的生命阶段。目前公认为潜伏期的KSHV 病毒通过对基因的选择性表达而作用于多种细胞调节途径，在病毒的致病过程中起主要作用。KSHV 至少编码90 个基因，其中只有少数基因在潜伏期表达。潜伏期相关核抗原（LANA）由开放阅读框73（ORF73）编码，存在于所有的KSHV 相关的肿瘤中。LANA 对保持潜伏期的KSHV 病毒在宿主细胞内作为外源性附加体（episome）存活起着重要作用。近来的研究表明LANA 可以作为协同激活因子或抑制因子对细胞信号在转录水平进行调节。LANA 可以在转基因小鼠体内引起B 淋巴细胞异形增殖和肿瘤并能通过外源基因沉寂抑制转化生长因子功能提示LANA 除了具有维持病毒基因组的功能外还有破坏B 淋巴细胞免疫功能的作用。.KSHV 能在宿主细胞内建立有效的潜伏感染而无法从体内清除。在普通人群中，KSHV的感染率约为5%。KSHV 维持潜伏感染和致癌机制是该研究领域的热点问题。仅有KSHV 病毒的感染并不足以诱发肿瘤的产生，基于文献检索及前期的工作基础，我们推断并将在此课题中证明除KSHV 病毒感染之外，细胞内（蛋白功能失活）和细胞外（肿瘤组织微环境，如缺氧信号）因子的相互作用对肿瘤的发生发展有促进作用。.LANA在维持病毒基因组的稳定中起着关键作用，在潜伏期促进DNA的复制和肿瘤发生。我们的研究LANA参与调解类泛素化，导致染色体沉默。为了检测LANA在宿主细胞基因表达的多种作用，我们采用质谱分析方法确定LANA与小泛素化相关修饰因子(SUMO)结合区(LANASIM)的相关细胞蛋白。我们发现6条与LANASIM作用带，质谱分析确定了151个蛋白。与之前N端和C端缺失LANA变异体比较分析，我们揭示了一组与LANA类泛素化及其结合区高度相关的特殊蛋白。我们还报道了KAP1作为重要的成分，SUMO-2修饰的异构体比SUMO-1修饰的异构体有更