CBX8在结直肠癌中的作用、机制及其临床意义

Colorectal cancer (CRC) is a common and deadly disease with high incidence and poor prognosis. The molecular mechanism of its occurrence and development and the identification of new therapeutic targets are the research focus. Recently, we found that the expression of CBX8 in CRC cancer tissues was significantly higher than those in the adjacent normal tissues and overexpression of CBX8 indicated a poor overall survival. We found silencing CBX8 made p53-targeted gene increasing and inhibited the proliferation of colorectal cancer cells significantly. Exogenous CBX8 combined with p53 directly. In this study, we aim to explore the role of CBX8 in CRC and clear that the mechanism may be through the regulation of p53 pathway, and to elucidate the expression and clinical significance of CBX8/p53 in CRC tissues. We propose a new mechanism that CBX8 promotes the proliferation of colorectal cancer cells through the regulation of p53 pathway. Our study may provide a new target for the comprehensive treatment of colorectal cancer and a new idea of the molecular mechanism of its occurrence and development.

结直肠癌(colorectal cancer, CRC)发病率高，预后差，其发生发展的分子机制、新治疗靶点的鉴定均是目前的研究热点。我们前期发现多梳基因家族蛋白CBX8在结直肠癌中高表达，且与不良预后相关；基因芯片结果表明：在结直肠癌细胞中沉默CBX8，可上调p53下游基因表达，并显著抑制结直肠癌细胞增殖；体外实验表明CBX8与p53存在直接相互结合。本项目拟沉默或过表达CBX8，在结直肠癌细胞水平、动物模型中，研究CBX8在结直肠癌中的作用，并明确其机制可能是通过调控p53通路。同时，用临床结直肠癌标本，探讨CBX8/p53通路的临床意义。从而明确CBX8可能通过调控p53通路促进结直肠癌细胞增殖的新机制，可能为结直肠癌的综合治疗提供新靶点，为诠释结直肠癌的发生发展分子机制提供新思路。

我们前期发现多梳基因家族蛋白CBX8在结直肠癌中高表达，且与不良预后相关；基因芯片结果表明：在结直肠癌细胞中沉默CBX8，可上调p53下游基因表达，并显著抑制结直肠癌细胞增殖；体外实验表明CBX8与p53存在直接相互结合。本项目中我们进一步检测CBX8蛋白在结直肠癌中呈高表达，通过扩大样本Kaplan-Meier分析显示CBX8低表达的患者预后较高表达的差；进一步 验证结直肠癌中CBX8不同表达水平对肠癌细胞增殖的影响：敲低CBX8后细胞生长减慢，但同时沉默p53和CBX8后， CBX8降低导致的细胞生长减慢得到逆转；同时检测细胞周期显示，CBX8降低导致的由G1/S交界处进入S期减慢也得到逆转；说明，CBX8对结直肠癌细胞的生长和细胞周期的影响主要依赖于p53。 验证结直肠癌中CBX8不同表达水平对肠癌细胞迁移侵袭能力的影响：敲低CBX8会导致肿瘤的迁移和侵袭能力增加，会导致肿瘤转移的大小和数量明显增多。我们发现CBX8可能通过影响Actin细胞骨架重构而在抑制结直肠癌细胞的迁移中发挥作用；敲低CBX8发现ITGB4升高，并发现CBX8与ITGB4启动子的几个区域有关；敲低CBX8去除对ITGB4启动子的抑制，从而导致ITGB4蛋白增高，这会减低RhoA的活性，并促进肿瘤细胞的转移。以上结果显示CBX8是维持结直肠癌细胞快速增殖的必要条件；CBX8主要通过抑制p53的转录活性而维持结直肠癌细胞的快速增殖。CBX8可能可以作为结直肠癌的一个新的预后指标。CBX8影响结直肠癌细胞骨架，可能抑制结直肠癌细胞迁移，CBX8可能在结直肠癌的不同发展阶段发挥不同的生物学功能。.此外，在本项目经费资助下，我们还进行了miR-634在肝细胞癌中的肿瘤抑制作用的研究。