IBD患者树突状细胞过表达OX40L致F.prausnitzii定植失能的机制研究

The intestinal microbiota of inflammatory bowel disease (IBD) patients is associated with established dysbiosis, which is characterized by significantly reduced Feacalibacterium prausnitzii (F. prausnitzii). Recent studies have documented that F. prausnitzii could alleviate intestinal inflammation via multiple mechanisms. And F. prausnitzii represents a promising new targets for IBD management. However, it remains unclear how F. prausnitzii was reduced in IBD patients. In this protocol, we proposed that the intestinal dendric cell, as well as its co-stimulating factor OX40L, might regulate the host's specific IgA immunoresponse to F. prausnitzii. We planned to conduct clinical study, animal model and cell experiments, where high throughout sequencing, western blot, cytoflowmetry and other necessary techniques will be employed. Dendritic cell transplantation experiments under various conditions will also be done to give a mechanistic explanations that the dysfunction of dendritic cells and (or) over-expression of OX40L might lead to the inability of F. prausnitzii to colonize the gut. Our protocol represents a significant step towards precise intervention of the intestinal microbiota.

炎症性肠病（IBD）患者存在显著的肠道菌群失调，以Feacalibacterium prausnitzii（F. prausnitzii）减少为特征。近年来的研究已经证实肠道菌群中的F. prausnitzii通过多种途径缓解肠道炎症反应，是IBD患者的重要干预靶点。然而目前尚不清楚F. prausnitzii在IBD患者肠道中显著减少的主要原因。本研究中我们提出，肠道树突状细胞及其免疫共刺激分子OX40L的表达水平可能调控宿主对F. prausnitzii的特异性IgA免疫反应。本课题拟在动物模型、临床研究和细胞研究中，采用高通量测序、Western电泳、流式细胞等方法，并进一步开展不同条件下的树突状细胞移植实验，从机制上阐明IBD患者DC细胞功能异常及OX40L过表达可能导致了肠道菌群中F. prausnitzii的定植失能。开展本课题研究对精准干预IBD患者的肠道菌群具有重要意义。

炎症性肠病（IBD）患者存在显著的肠道菌群失调，以Feacalibacterium prausnitzii（F. prausnitzii）减少为特征。近年来的研究已经证实肠道菌群中的F. prausnitzii通过多种途径缓解肠道炎症反应，是IBD患者的重要干预靶点。然而目前尚不清楚F. prausnitzii在IBD患者肠道中显著减少的主要原因。本研究中我们提出,肠道菌群中F. prausnitzii的减少可能同宿主免疫异常存在一定因果关系。在研究结果中，我们首先通过16S rDNA测序确认了与健康对照者相比UC患者中F. prausnitzii减少，并伴有粪便上清液中与F. prausnitzii反应的IgA抗体增加。我们通过免疫电泳、质谱分析发现普拉梭菌的丙酮酸铁氧蛋白氧化还原酶(pyruvate:ferredoxin oxidoreductase, PFOR) 是F. prausnitzii被宿主IgA识别的主要抗原。在动物实验中，免疫F. prausnitzii或者PFOR都能使得肠道菌群中含PFOR菌属的总和下降，并且引起肠黏膜组织中IFN-γ的高表达。在细胞实验中进一步确认了完整的PFOR能够刺激外周血单个核细胞分泌IFN-γ，而PFOR的无活性肽段没有类似作用。生物信息研究表明，PFOR在肠道菌群的多个主要物种中存在。用另一种含有PFOR的有害细菌，具核梭杆菌，对大鼠灌胃后发现，粪便菌群中PFOR基因的减少。这些结果表明对肠道菌群中PFOR蛋白的免疫反应可能参与了UC发病，PFOR是肠道菌菌群与免疫对话的重点。肠道菌群继发于免疫的变化主要在于共有抗原含量的变化，而非特定物种的变化。抗PFOR-IgA检测可能用于UC患者病情评估。