卵巢癌转移相关蛋白EMMPRIN反馈调节机制的研究

EMMPRIN/CD147是一个研究的热点分子，它高表达于癌细胞表面，与癌细胞的运动、转移、增殖、血管生成及信号转导有关。目前关于EMMPRIN/CD147的转录调节机制、转录异构体的功能及其作用机制的研究尚无报道。本课题利用启动子报告基因、EMSA、甲基化特异性PCR等技术证实Sp1对EMMPRIN/CD147的调控关系以及甲基化对其的弱化作用，并通过表达或基因沉默EMMPRIN/CD147来检测其对PI3K/Akt信号通路的作用和对Sp1活性的影响。再利用激光共聚焦、Pull down、BIFC等技术研究EMMPRIN/CD147转录异构体的作用机制，进而证实EMMPRIN/CD147的调节是否存在着Sp1-EMMPRIN/CD147之间的正反馈机制，并且明确EMMPRIN/CD147不同转录异构体的负反馈机制。

本研究首先通过RT-RCR，Taqman realtime PCR和western blot等方法，检测了Basigin剪接变异体（Basigin-2、Basigin-3、Basigin-4）在卵巢癌组织和细胞系中的表达情况，证明Basigin-2和Basigin-4在卵巢癌组织中特异表达，其中Basigin-2的表达量远高于Basigin-4，说明Basigin-2在卵巢癌的作用更为重要。进一步收集146例卵巢癌组织标本，通过免疫组织化学实验观察Basigin-2的表达情况，通过Kaplan-Meier和Cox比例风险模型分析，评估Basigin-2与无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）的相关性，证明Basigin-2在卵巢癌的恶性潜能中起非常最要的作用。之后分别利用重组质粒pcDNA3.1-Basigin-2转染低转移卵巢癌细胞株HO-8910和Basigin-2 siRNA干涉高转移卵巢癌细胞株HO-8910PM，观察Basigin-2对卵巢癌细胞系的侵袭转移以及诱导MMPs分泌能力的影响。.　　本研究首次鉴定了Basigin-2剪接变异体在卵巢癌中的表达，发现Basigin-2可以作为卵巢癌的独立预后因素，且与卵巢癌转移侵袭能力密切相关，初步评估了Basigin-2作为卵巢癌靶点的可行性，为卵巢癌的治疗提供了新的思路。