MicroRNA与系统性红斑狼疮发病相关性的分子流行病学研究

系统性红斑狼疮(SLE）是一种典型的自身免疫性疾病，本课题组前期研究发现Th17及其相关细胞因子在SLE的发病中起重要作用，而最新证据表明一种微小RNA(miRNA)-miR-326能够促进Th17分化，提示miR-326可能在SLE发病中扮演着重要角色。除miR-326，近年来已发现多种与自身免疫性疾病相关的miRNA，其是否也与SLE发病有关尚不明确。血浆miRNA具有含量丰富、性质稳定、易于检测等特征，已作为一类新型生物标志物用于肿瘤等慢性非传染性疾病的早期筛查、诊断和预后评估研究。本课题拟通过收集SLE患者和正常对照的血液标本，利用PCR芯片检测其血浆miRNA表达水平，并进行独立验证，结合人口统计学资料和临床资料，建立SLE及不同临床亚型的血浆miRNA表达谱；对最终确定的异常表达miRNA及其靶基因进行多态性检测，初步探讨相关miRNA在SLE发病中的分子机制。

本项目采用病例对照研究，利用miRNA芯片检测系统性红斑狼疮（SLE)患者血浆miRNA表达水平，并利用Real-time PCR方法进行独立验证，结合人口统计学资料和临床资料，建立SLE血浆miRNA表达谱，探讨异常表达的miRNAs与SLE患者临床特征间的关联。同时比较SLE患者和正常对照之间、狼疮肾炎（LN）患者和SLE未合并肾炎患者之间以及SLE患者出现某种首发症状和未出现某种首发症状之间hsa-miRNA-146a、hsa-miRNA-149和hsa-miRNA-196a2前体区域的多态性位点rs2910164、rs2292832和rs11614913等位基因和基因型频率分布的差异，探讨miRNA基因前体区域单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮遗传易感性关联。结果发现，最终筛选出差异表达的人类miRNAs有158个，其中表达上调有32个基因，表达下调有126个基因。Real-time PCR验证发现miR-16-5p，miR-101-3p和miR-25-3p在SLE患者和对照组血浆中的表达差异仍有统计学意义。皮疹阳性组与阴性组间、血小板降低组与非血小板降低组间的miR-16-5p和miR-101-3p表达水平差异均有统计学意义。SLE患者血浆miR-25-3p表达水平在有无光过敏症状的两组患者间差异有统计学意义。Hsa-miRNA-146a、hsa-miRNA-149和hsa-miRNA-196a2前体区域内的SNPs rs2910164、rs2292832和rs11614913及其构建的单倍型与中国人群SLE的遗传易感性无关，且未发现基因间存在交互作用。Hsa-miRNA-146a和hsa-miRNA-149前体区域的多态性位点rs2910164和rs2292832与中国人群LN的遗传易感性有关，但未发现基因间存在交互作用。Hsa-miRNA-146a前体区域的多态性位点rs2910164与SLE患者首发关节炎和肾脏损害有关，hsa-miRNA-196a2前体区域的多态性位点rs11614913与中国人群SLE患者首发关节炎有关。以上研究成果为进一步研究miRNAs在SLE中的作用提供宝贵资料，特别是探讨miRNA作为潜在诊断分子标志物的可能性，从而为临床诊断和治疗提供新的思路。