一种新型肿瘤靶向性非病毒载体转导白介素2对恶性黑色素瘤的抗肿瘤机制及其临床相关性研究

皮肤恶性黑色素瘤（恶黑）是皮肤癌中恶性程度最高的肿瘤，常常导致高的致死率。当前，临床上对转移性恶性黑色素瘤没有有效的治疗方法。大剂量、反复系统性注射白介素2（IL-2）细胞因子蛋白，对晚期黑色素瘤患者显示了最好的疗效。然而，由此常常导致患者伴发严重的毒副反应。最近，我们合成了一种新的多聚阳离子化合物（PEI-CyD-FA,命名为H1），它被证明是一种低毒、高效和叶酸受体靶向性的基因传递载体。随后，我们使用H1浓缩、包装编码IL-2基因的质粒，制作成直径在100纳米左右的纳米离子制剂（H1/pIL-2）。在小鼠黑色素瘤模型上，我们发现H1/pIL-2（DNA 50ug）能显著的抑制肿瘤生长，延长荷瘤鼠的存活时间。其治疗效果与Adv-IL2(2×108，pfu)相似。为进一步研究H1/pIL-2纳米粒子的抗肿瘤机制，探索其临床相关性，我们特申请此项目。

皮肤恶性黑色素瘤（恶黑）是皮肤癌中恶性程度最高的肿瘤。目前，对晚期恶性黑色素瘤还没有很好的治疗药物。高剂量的IL-2细胞因子冲击疗法是FDA批准的最新疗法，然而由于大剂量、多次重复给药导致患者伴发严重的毒副反应，使其临床应用受到限制。为发展一种新的、更有效、安全的治疗方案，在国家自然科学基金青年项目资助下，本课题组成功发展了一种转导IL2基因的非病毒、生物可降解及肿瘤靶向性的纳米粒子(H1/pIL2)，并证明：在恶性黑色素瘤局部及转移性小鼠模型上，瘤周注射H1/pIL2均能能显著抑制肿瘤的生长，提高嗬瘤鼠的生存时间，其抗肿瘤功效呈剂量依赖性。与常规临床实验使用Adv-IL2相比较，其抑瘤效率优于单次Adv-IL2给药，略低于多次Adv-IL2给药;其抗肿瘤机制主要是通过分泌IL2细胞因子，激活体内抗肿瘤免疫效应细胞CD4+，CD8+， NK细胞，促进其增殖和肿瘤内浸润而发生直接的抑瘤作用；此外，我们也发现，H1/pIL2治疗刺激小鼠产生T17细胞，而抑制肿瘤细胞刺激的Treg产生，这些，可能是由于质粒非甲基化CpG双核苷酸，通过Toll９受体激活抗原递呈细胞而引起。总结起来，我们的研究证明： H1/pIL2纳米粒子是一种有效、安全的抗恶性黑色素瘤基因治疗方法，具有一定的临床应用相关性。在此项目资助下，本课题组发表SCI收录论文3篇，国际会议论文3篇，申请中国专利1项；参与培养毕业博士研究生3名，培养中青年学术带头人1名，在培硕士研究生1名。后续研究获2014年云南省重点项目基金资助。