抗体介导的PRRSV感染中FcγR和病毒受体的交联作用机理

Porcine reproductive and respiratory syndrom (PRRS) is one infectious disease caused by porcine reproductive and respiratory syndrom virus(PRRSV). One of important immunological characteristics of PRRS is persistent infections of PRRSV-antibody complexs in host cells. This proposal intends to investigate the molecular mechanisms of PRRSV-antibody entry and establishment of persistent infection, which has important guiding significance for research of new vaccine. To elucidate the molecular mechanism of PRRSV-antibody infection,the endocytosis of alone virus or virus-antibody mediated by viral receptor(Sn, CD163) or FcγR is studied by confocal fluorescence, fluorescence quantitative PCR，and blocked test using anti-FcγR IgG or anti-Sn IgG or anti-CD163 IgG,so on. The virus-antibody endocytosis co-mediated by FcγR,and Sn and CD163 viral receptor, is studied by confocal fluorescence, fluorescence quantitative PCR and blocked test using anti-FcγR IgG,and anti-pSn IgG,and anti-CD163 IgG, so on. Molecular characteristics of different FcγR, and signaling pathways of antiviral immune response mediated by different FcγR, are studied by real-time PCR,immunoprecipitation test and protein spectrum methods, so on；Molecular characteristics of activating FcγR with inhibitory ITAMs,and signaling pathways of antiviral immune response mediated by activating FcγR with inhibitory ITAMs are studied by real-time PCR,immunoprecipitation test and protein spectrum methods, in PRRSV-antibody infection to host cell.

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的重要传染病，其免疫学特征之一是抗体介导的PRRSV持续感染。本课题围绕抗体介导的PRRSV感染宿主细胞过程中FcγR和病毒受体存在交联作用这一科学问题，拟通过荧光共聚焦技术、荧光定量PCR方法以及PRRSV-抗体复合物感染封闭试验等，研究病毒受体（Sn 和CD163）及Fcγ受体（FcγⅠ、FcγⅡb和FcγⅢ等）在病毒-抗体免疫复合物内吞过程中的协同作用以及参与该内吞过程中病毒受体的功能结构域；通过荧光定量PCR技术、免疫共沉淀技术和蛋白质谱技术等，研究不同类型Fcγ受体介导的抗病毒免疫反应、筛选鉴定带有抑制信号的激活型FcγR亚型与异构体，并研究各自介导的免疫抑制信号同路。这将完善抗体介导的病毒持续感染机制，对PRRS新型疫苗的研制具有重要的指导意义。

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS）是猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的重要传染病，其免疫学特征之一是抗体介导的PRRSV 持续感染。本课题围绕抗体介导的PRRSV 感染宿主细胞过程中FcγR 和病毒受体存在交联作用这一科学问题，研究发现了病毒受体(Sn 和 CD163）及 Fcγ受体（FcγⅠ、FcγⅡb 和 FcγⅢ 等）共同介导病毒入侵宿主细胞的新机制，其中的 FcγⅠ受体、Sn 的第 9、10、13 功能结构域以及 CD163 分子的 D1 和 D5 功能结构域发挥了重要作用。研究发现，PRRSV 利用病毒自身成分和病毒受体平衡调控PRRSV-ADE 感染中的天然免疫，其中FcγⅠ、FcγⅢ 激活型受体和病毒受体Sn 等体通过抑制 IRF3 的磷酸化而负调节PRRSV-ADE 感染中的天然免疫反应，FcγⅡb 抑制型受体和病毒结构蛋白 GP5、GP6 等通过增强 IRF3 的磷酸化而正向调节 PRRSV-ADE 感染中的天然免疫反应；这将完善抗体介导的病毒持续感染机制，对PRRS新型疫苗的研制具有重要的指导意义。