电化学诱导方法定点切割DNA

开展DNA定点切割研究对控制和治疗基因疾病具有重要意义。本项目旨在合成一系列具有不同结构的希夫碱作为配体，与Cu(Ⅱ)、Fe(Ⅲ)、Co(Ⅲ)等具有电活性的过渡金属离子反应，获得不同组成和结构的配合物，以不同的方式定点结合到DNA的分子链上；在微型电解池中，利用电化学诱导方法，使过渡金属配合物在电极表面还原，配合物的还原态与饱和溶解氧反应，过程中产生的活性氧物种进攻DNA分子，促使DNA链的断裂；使用凝胶色谱和凝胶电泳技术，对断裂后的DNA片段进行分离、收集；通过元素分析、波谱和质谱等技术表征以确定片段的组成和结构；根据对DNA片段的表征结果，结合生化知识，推定DNA断裂点位；探明不同组成和结构的配合物与DNA的切割效率和断裂位点的关系，实现能在温和环境下对DNA进行有效、定点地切割；建立一种能在接近生理条件下进行DNA定点切割的新方法，为发展基因疾病的治疗手段提供理论依据。