HBV宫内隐匿性感染特征及其分子机制的研究

With national-wide spread of HB vaccine, most of hepatitis B virus horizontality transmission were under control. Mother-to-infant transmission will be the main route for HBV transmission. Generally speaking that HBsAg is the key evidence for diagnosis of HBV introuterine transmission, we find recently that occult HBV infection exist among infants born to HBV carrier mothers. However, the prevalence and its potential molecular mechanism remains unknown yet. This project is based on HBsAg carrying mothers and their newborns. Cohort study, nested case-control study were employed to find out the prevalence and related risk factors about intrauterine OBI, to identify its prognosis that were never reported before. PCB-HPT model was also used to make sure what have confirmed in the previous population-based study. From in vitro and in vivo, analysis of newborn mechanism of OBI, epidemiological characteristics and influencing factors. In order to clarify the characteristics of intrauterine OBI, potential molecular mechanisms of transmission and provide a solid basis.

随着乙肝疫苗的广泛使用，HBV的水平传播将得到控制，宫内传播逐步演变为HBV主要传播模式。通常认为新生儿外周血HBsAg阳性是发生宫内传播的重要证据，但我们最近研究发现还存在大量的宫内隐匿性HBV感染(OBI)的新生儿，新生儿OBI是对现有认识的补充，其基本流行状况、传播机制及其与婴幼儿人群乙肝病毒携带的关系都值得关注。本项目基于前期HBsAg携带母亲及其新生儿研究队列，对HBV宫内感染尤其是OBI的新生儿人群进行巢氏病例对照研究和随访队列研究，筛选与发生宫内OBI相关的宿主因素和病毒基因特征，探索新生儿发生宫内OBI后的不同转归及影响因素；并采用PCB-HPT模型进行体外病毒攻击实验，从体内和体外2个层次分析新生儿OBI的发生机制、流行特征和影响因素，以期为阐明宫内OBI的特征、传播途径和分子机制提供可靠依据。

HBsAg阳性产妇为乙肝传染源的高危群体，不仅HBV 宫内传播无法完全阻断，而且其子代是乙肝免疫失败的主体人群，可能与HBV宫内隐匿性感染有关，而目前具体情况尚不清晰，本项目从宏观人群研究和微观细胞与分子水平展开研究。①人群研究：0-1岁为幼儿乙肝高发年龄段，91.7%母亲孕期即为HBsAg阳性携带者，证实幼儿发生HBV感染存在2种途径——宫内传播和母婴传播。前瞻性队列HBV宫内传播率、显性感染率、隐匿性感染率分别为46.51%、8.14%、38.37%，宫内隐匿性感染是显性感染4.71倍，其中产妇HBeAg阳性、HBV DNA定量高载量、发生前置胎盘和未注射乙肝免疫球蛋白发生HBV宫内传播的危险因素；随访发现其子代HBV宫内显性感染组、隐匿性组和未传播组的乙肝免疫应答率分别为61.54%、78.38%和65.00%；幼儿发生HBV隐匿性感染者乙肝免疫应答率仅为50%。证实HBV隐匿性感染是免疫无应答的高危因素。②产妇PBMC研究：产妇感染HBV的PBMC中80.85%为C基因型，PBMC中B基因型中HBV宫内显性感染、隐匿性感染和未传播所占的比例分别为33%、45%和22%；C基因型中HBV宫内显性感染、隐匿性感染和未传播所占的比例分别为26%、69%和5%。HBsAg阳性产妇外周血C基因型发生HBV宫内隐匿性感染的概率是B基因型的8.57倍，产妇PBMC感染HBV与体内高HBV DNA载量和HBeAg阳性密切相关。在感染实验中胎盘屏障滋养细胞的感染率分别为：50%、0%、37.5%和12.5%，存在显著性差异，验证了胎盘滋养细胞感染HBV可以存在PBMC细胞途径和体液途径。③细胞因子研究：HBV可以激发孕产妇体内IFN-γ、IL-18的表达，同时抑制IL-12的分泌，但是IFN-γ在HBsAg阳性产妇体内的表达呈现组内分化现象，IL-18可对其子代发生HBV宫内显性感染和隐匿性感染进行预判，同时提高HBsAg阳性产妇的IFN-γ、IL-12和IL-18水平提高母体细胞免疫功能，有利于阻断HBV宫内传播。④TLR9研究：HBV一定程度下会抑制产妇体内分泌TLR9水平，但HBeAg能刺激母体TLR9分泌，在HBsAg阳性产妇人群中随着HBV宫内传播程度的加重，其体内TLR9水平呈增高的组内交叉分化现象，TLR 9可以做为监测管理的有效指标。