Foxp3通过UXT抑制乳腺癌增殖的分子机制研究

Foxp3是调节性T细胞发育和功能发挥的关键调节因子，在诱导和维持自身免疫耐受和免疫自稳中发挥重要作用。近来，文献研究发现，Foxp3在肿瘤的发生发展中也具有重要作用，Foxp3 突变的小鼠乳腺癌发生率大幅度增高；这种小鼠正常乳腺高表达Foxp3 ，而乳腺癌组织Foxp3低表达，并且Foxp3能抑制乳腺癌相关癌基因HER-2/ErbB2，SKP2的表达，所以该研究结果提示Foxp3是乳腺癌发生的抑制基因。我们利用酵母双杂交筛选出泛表达转录子UXT与Foxp3具有相互作用；文献研究发现，UXT能提高雌激素受体ER调控的转录活性。据此，本课题通过双荧光素酶报告基因，免疫组化，RT-PCR, western blot, FCM, 慢病毒转染等技术明确Foxp3通过与UXT相互作用抑制ER下游乳腺癌增殖相关基因的转录表达，从而抑制乳腺癌的增殖。该研究旨在为Foxp3作为乳腺癌抑制基因提供新的机制。

Foxp3 是调节性 T 细胞发育和功能发挥的关键调节因子，在诱导和维持自身免疫耐受和免疫自稳中发挥重要作用。近来，文献研究发现，Foxp3 在肿瘤的发生发展中也具有重要作用，Foxp3突变的小鼠乳腺癌发生率大幅度增高；并且Foxp3 能抑制乳腺癌相关癌基因 HER-2/ErbB2，SKP2 的表达，所以Foxp3 是乳腺癌发生的抑制基因。我们利用酵母双杂交筛选出泛表达转录子 UXT 与Foxp3 具有相互作用，并在哺乳动物细胞中进一步确证了二者的相互作用；文献研究发现，UXT 能提高雌激素受体 ER 调控的转录活性。据此，本课题初步设想为明确 Foxp3 是否能通过与 UXT 相互作用抑制 ERα下游乳腺癌增殖相关基因的转录表达，从而抑制乳腺癌的增殖。但是在研究过程中，我们发现单独的Foxp3能与雌激素受体ERα相互作用，并增强其介导的转录激活活性；但是Foxp3对受ERα调控的细胞增殖相关基因表达没有影响。通过transwell实验，我们发现两者的相互作用影响了乳腺癌细胞的转移。通过进一步实验，我们发现了受Foxp3与ERα相互作用影响的靶基因vinculin。Vinculin是细胞黏着斑的组成蛋白，参与细胞间的黏附，及细胞间的信号转导。研究发现，在多种肿瘤中vinculin的表达下调，与肿瘤细胞的转移，凋亡密切相关。我们发现，ERα能够促进Vinculin的启动子活性，而单独的Foxp3 对Vinculin的启动子活性并没有影响，但是Foxp3能够促进ERα对 Vinculin启动子活性的激活作用。在ERα存在条件下，过表达Foxp3可以明显上调vinculin的表达；而干涉Foxp3后，vinculin的表达量下降。这些发现提示在乳腺癌中， Vinculin是ERα调控的下游靶基因；ERα可通过促进vinculin的表达抑制转移，而Foxp3能通过与ERα的相互作用进一步促进vinculin的表达从而抑制乳腺癌的转移。该项目为进一步阐明Foxp3与ERα相互作用在乳腺癌中的意义提供了新的思路。