UXT通过MDMX对P53信号通路进行调控的机制研究及其对乳腺癌的临床意义

P53 plays such important role in tumor development, and MDMX is the one of two key regulators for P53. We previously found that UXT was able to bind MDMX by yeast 2 hybrid assay. Under UXT depletion, P21 protein level increased. When combined si-P53 with si-UXT, the upregulation of P21 was compromised. This suggested that UXT regulated P21 in P53 dependent manner. Further study implied that MDM2/MDMX complex might be required. We are going to apply multiple methods to investigate the function and mechanism of UXT in basic or clinical sciences, such as molecular cloning, cell culture, siRNA, lentivirus package and transfection, stable cell line construction, nude mice xenografts and immunohischemistry in order to provide new ideas for breast cancer diagnosis,therapy and rehabilitation.

P53通路在肿瘤的发生、发展中起重要调控作用，而MDMX是P53非常关键的负调节因子之一。我们前期在酵母双杂交实验中发现UXT可与MDMX结合，在敲降UXT的乳腺癌细胞中，P21蛋白水平明显上调，而同时敲降P53可以抑制其上调作用，证明UXT可以调控P53依赖的P21。并且进一步的研究显示这一作用极有可能是MDM2/MDMX依赖性的。我们拟采用分子克隆、细胞培养、siRNA、病毒包装与感染、稳定株构建、裸鼠成瘤和免疫组化分析等多种方法对UXT进行基础及乳腺癌临床研究，探明UXT在P53通路中的调控作用，对阐明UXT在乳腺癌发生、发展中的作用机制有重要意义，为临床乳腺癌诊断、治疗、康复提供新思路。

P53可响应多种应激而被激活，其重要性已被广泛研究并确认。但P53抑制肿瘤基因的机制还没被完全探明。UXT是我们通过实验发现的一个新的P53抑制因子，它可与MDMX结合而抑制P53的基本活性。人类TCGA数据库显示UXT在人类肉瘤中频繁扩增，且其P53很少突变。因此我们利用肉瘤作为模型，以显示UXT是一个肿瘤基因，体外实验显示其促进细胞增殖，体内实验显示其促进肿瘤增长。10条主要细胞信号通路筛选显示，UXT介导的Ｐ53抑制作用导致了 NF-κB的激活，引起了糖酵解。糖酵解增高有利于生长，同时也使得表达UXT的肉瘤细胞对糖酵解抑制的敏感性提高。总而言之，我们证明了P53的基本活性在限制 NF-κB方面的重要作用。通过抑制P53的这个基本活性，UXT启动了 NF-κB的致瘤作用，导致糖酵解促进致瘤作用。