葡萄球菌超抗原抑制骨肉瘤转移及其靶向治疗的研究

骨肉瘤术后感染患者复发转移发生率呈现降低趋势，十年生存率比未感染者提高20%；临床分析85%感染源是葡萄球菌，提示葡萄球菌感染很可能通过增强机体的抗肿瘤免疫应答来降低肿瘤转移，但机制尚不清楚。我们推测：葡萄球菌的超抗原可能诱导机体对肿瘤抗原的交叉免疫应答来杀灭肿瘤。本课题拟⑴分析骨肉瘤合并术后感染和未感染、发生转移和未转移患者的外周血淋巴细胞亚群功能表型以及它们对肿瘤抗原刺激的应答。⑵在体外模型中，检测不同类型葡萄球菌超抗原激活后的淋巴细胞对骨肉瘤细胞杀伤作用，筛选有效诱导杀伤骨肉瘤细胞的超抗原类型。⑶利用筛选出的超抗原，结合我们新近发现的在骨肉瘤细胞中特异性高表达肿瘤-睾丸抗原PRAME，构建相应的抗体和超抗原融合复和物，在体内模型中，验证其稳定性和抑制骨肉瘤细胞转移的能力。本研究通过超抗原激活机体的免疫系统，阻止肿瘤的免疫逃逸，建立骨肉瘤靶向免疫治疗，降低远处转移，提高长期生存率。

本研究旨在探讨PRAME在骨肉瘤组织中的表达情况及其表达变化与疾病预后的关系，同时应用RNAi干扰技术下调PRAME在体外人骨肉瘤细胞中的表达，观察PRAME基因下调对细胞生物功能的影响，从而探讨其在体外人骨肉瘤细胞中可能潜在的生物功能。多数骨肉瘤患者标本组织中出现PRAME基因及蛋白异常高表达，而且PRAME基因和蛋白在骨肉瘤组织表达变化与疾病进展、预后相关，PRAME有着作为骨肉瘤诊断、预后分子标志物和潜在的肿瘤免疫治疗靶向目标的应用价值。PRAME对人骨肉瘤细胞增值、克隆形成能力及细胞生长周期有着重要的作用，但PRAME在肿瘤细胞中的具体功能和作用机制仍不清楚，有待进一步的探索和研究。在本基金的资助下我们还研究了GSK-3β对骨肉瘤细胞增殖的影响。沉默或碳酸锂药物抑制GSK-3β导致了骨肉瘤的细胞的凋亡。抑制GSK-3β导致了NF-kB通路的阻断，减少了NF-kB介导的转录。联合应用GSK-3β与NF-kB阻断剂可以增加骨肉瘤化疗药物在体外体的敏感性。GSK-3β与NF-kB表达失活的骨肉瘤患者的五年生存优于GSK-3β与NF-kB表达活跃的骨肉瘤患者。因此GSK-3β可以作为骨肉瘤潜在的治疗靶点。