他克莫司抑制中波紫外线辐射后表皮朗格汉斯细胞迁移的机制研究

Topical calcineurin inhibitors (TCI), including tacrolimus ointment and pimecrolimus cream, are widely used in the treatment of atopic dermatitis. So far we still know little about the effects of TCI on epidermal Langerhans cell (LC). The results of our preliminary experiments suggested that TCI protected against long-term suberythemal UVB irradiation-induced epidermal LC reduction, and topical pimecrolimus could reverse high-dose UVB-induced LC reduction by inhibiting LC migration. The increase in the level of IL-18、IL-1β、TNF-α or integrin α6, and the decrease in the level of E-cadherin could promote LC migration from epidermis to dermis. It has been reported that tacrolimus dose-dependently downregulated the secretion of TNF-α from UVB-irradiated keratinocytes via regulation of NF-κB. Herein, we propose a hypothesis that TCI could inhibit UVB-induced LC migration by downregulating the secretion of TNF-α. To verify this hypothesis, we will use immunohistochemistry, reverse transcription-PCR, Western blot, flow cytometry and other means to investigate the specific mechanism of inhibition effects of tacrolimus on UVB-induced epidermal LC migration from molecules, cells, tissues and other aspects. This study would provide new evidence for safety study of TCI (increasing photocarcinogenesis?) from the new viewpoint of inhibition effects of TCI on epidermal LC migration.

外用钙调磷酸酶抑制剂（TCI）包括他克莫司软膏和吡美莫司霜是治疗特应性皮炎的热点药物，迄今TCI对皮肤朗格汉斯细胞（LC）的作用仍知之甚少。我们的预实验结果提示TCI能对抗长期低剂量UVB辐射引起的表皮LC减少；吡美莫司能通过抑制表皮LC迁移而逆转高剂量UVB辐射引起的表皮LC减少。IL-18、IL-1β、TNF-α、α-6整合素升高，E-钙黏附素降低均能促进LC迁移入真皮。有报道他克莫司能通过调节NF-κB抑制UVB辐射后角质形成细胞分泌TNF-α。为此，我们提出假说：他克莫司可能通过抑制UVB辐射后TNF-α的分泌进而抑制表皮LC迁移入真皮。为验证这一假说，我们将采用免疫组化、逆转录PCR、Western blot、流式细胞术等手段，从分子、细胞、组织等多方面探讨他克莫司抑制UVB辐射后LC迁移的具体机制。本研究将从他克莫司抑制表皮LC迁移这个新视点为TCI是否增加光致癌性提供新的证据

外用钙调磷酸酶抑制剂（TCI）包括他克莫司软膏和吡美莫司霜是治疗特应性皮炎的热点药物。有报道中波紫外线（UVB）辐射可以导致表皮朗格汉斯细胞（LC）减少，另有报道在体外实验他克莫司能抑制UVB辐射后角质形成细胞分泌TNF-α。TNF-α升高能促进表皮LC迁移入真皮。为此，我们提出假说：他克莫司可能通过抑制UVB辐射后TNF-α的分泌进而抑制表皮LC迁移入真皮。为验证这一假说，我们采用免疫组化、实时荧光定量PCR、蛋白质印迹、流式细胞术等手段，从分子、细胞、组织等多方面探讨他克莫司抑制UVB辐射后表皮LC迁移的具体机制。本项目经过实验研究证实了UVB辐射引起表皮LC数量减少主要是通过促进表皮LC的迁移，参与的分子机制主要是UVB辐射引起表皮角质形成细胞NF-κB/p65表达升高进而诱导TNF-α表达增加，anti-TNF-α可以拮抗UVB辐射诱导的表皮LC迁移（P < 0.01）。他克莫司通过调控表皮角质形成细胞NF-κB/p65的表达，抑制UVB辐射诱导的角质形成细胞分泌TNF-α，进而对抗UVB辐射引起的表皮LC迁移导致的表皮LC数量减少。表皮LC是皮肤中最重要的抗原递呈细胞，发挥免疫监视和启动免疫反应的作用。表皮LC摄取抗原、迁移进行抗原递呈在对抗皮肤癌发生的过程中起到重要的作用。UVB是诱发皮肤癌的重要因素，抑制UVB辐射后LC的迁移，在一定程度不利于表皮LC摄取抗原后进行抗原呈递。虽然LC的免疫监视能力依然存在，但迁移的受阻使LC无法刺激进一步的充分的皮肤免疫反应，这在理论上削弱了表皮LC发挥其对抗皮肤癌发生的作用。本研究从外用他克莫司抑制UVB辐射后表皮LC迁移这个新视点为外用他克莫司可能增加光致癌性提供新的理论依据。