超声微泡载体系统介导Endostatin基因靶向干预动脉粥样硬化及其机制研究

由动脉粥样硬化引起的心脑血管疾病已成为致残致死的主要原因，有效防治动脉粥样硬化是降低心脑血管意外的重要手段。新近研究显示动脉粥样硬化斑块内存在病理性新生血管，它可促进动脉粥样硬化病变的发展，甚至诱发斑块内出血和斑块破裂。因此，以新生血管为治疗靶点，采取有效方法抑制血管新生将会抑制粥样斑块的生长，可能成为治疗动脉粥样硬化的有效途径之一。内皮抑素（endostatin，ES）是目前公认最强的血管生成抑制因子之一，随着分子生物学技术的飞速发展，从基因水平探索动脉粥样硬化疾病的有效治疗方法已成为研究的热点及方向。本研究在前期超声破坏微泡介导ES基因转染颈动脉粥样硬化模型兔胫前肌有效抑制斑块生长的基础上，拟采取超声介导载ES基因微泡在病变颈动脉靶向释放ES的方法，探讨超声微泡载体系统介导ES基因靶向治疗动脉粥样硬化的有效性及其机制，为认识动脉粥样硬化的发病机制和防治动脉粥样硬化提供一个新的视点。

动脉粥样硬化斑块内的新生血管在斑块的发生、发展及破裂中发挥重要作用，以斑块内新生血管为治疗靶点，采取有效方法抑制血管新生从而防治动脉粥样硬化的观点日益受到重视。超声爆破微泡介导基因转染是近年发展起来的一项安全高效的新技术，为疾病的诊断和治疗带来了新的途径，国内外就此方法开展了许多研究并取得了可喜的成果。本课题利用超声微泡介导内皮抑素基因在抑制动脉粥样硬化方面进行了一些研究，探讨超声微泡载体系统介导内皮抑素基因靶向治疗动脉粥样硬化的有效性及其机制。首先本研究构建并提取了内皮抑素和增强型绿色荧光蛋白共表达质粒pIRES2-EGFP-hES，通过前期的细胞实验摸索超声微泡介导基因转染血管内皮细胞的最佳转染参数，主要包括超声辐照强度、辐照时间及微泡浓度几个方面，研究发现MI 1.0、微泡浓度20%及辐照60s时绿色荧光蛋白表达相对多。在后期的研究中建立了兔颈动物粥样硬化模型，采用超声微泡介导内皮抑素基因转染模型兔病变血管，通过定点照射实现基因的靶向释放，研究发现超声微泡介导内皮抑素基因组其斑块较其他实验组小，表明超声微泡有携带目的基因靶向运载作用，可提高局部组织/细胞的基因转染和表达，从而达到局部有效药物浓度,可为动脉粥样硬化基因治疗提供新的方法。