新型超声微泡载体系统介导CTGF siRNA靶向治疗肝纤维化

肝纤维化是各种慢性肝病共有的病理改变，是慢性肝病治疗中亟待解决的问题。利用RNA干扰技术靶向性阻断结缔组织生长因子（CTGF）是当今抗纤维化研究的新热点，关键是如何将小干扰RNA（siRNA）简便、安全、高效、可控地导入组织或器官中。本项目在前期成功制备长循环脂质超声造影剂的基础上，利用正负电荷的相互吸引作用或采用生物素-亲和素-生物素连接的方法，优化脂质体纳米粒耦连到超声微泡上的条件；利用高机械指数诊断超声破坏微泡提高肝区微血管通透性，探讨利用诊断超声介导基因转染或药物传输的优化条件；在新型超声微泡载体系统的基础上，综合运用多种载体及靶向技术介导CTGF siRNA靶向治疗肝纤维化。项目研究是对原有超声微泡载体系统的改进和发展，预期会有效克服目前超声微泡介导药物靶向传输或基因转染的局限性，并探索性地应用于肝纤维化的基因治疗,为进一步应用奠定基础。

肝纤维化是各种慢性肝病共有的病理改变，是慢性肝病治疗中亟待解决的问题。利用RNA干扰技术靶向性阻断结缔组织生长因子（CTGF）是当今抗纤维化研究的新热点，关键是如何将小干扰RNA（siRNA）简便、安全、高效、可控地导入组织或器官中。超声靶向微泡破坏（UTMD)因其安全、高效以及局部基因传输能力被认为是一种神奇的非病毒基因载体技术，但基因携带能力差仍然是需要攻克的难题。本项目在前期成功制备长循环脂质超声造影剂的基础上，采用同样的工艺，成功制备阳离子脂质纳米粒、生物素化的脂质超声造影剂和生物素化的阳离子脂质纳米粒；采用生物素-亲和素-生物素连接的方法，成功将阳离子脂质纳米粒耦连到超声微泡上，发展了一种新型超声微泡载体系统，明显提高了微泡携带基因的能力；利用高机械指数诊断超声破坏微泡明显提高了肝区微血管及肝细胞的通透性，为基因转染创造了更优化的条件；利用新型超声微泡载体系统介导针对CTGF的人工microRNA(amiRNA)靶向治疗肝纤维化，结果表明该方法可有效地传输CTGF amiRNA靶向肝组织，沉默CTGF基因，下调TGF-β1的表达，抑制肝星状细胞的激活，减少胶原沉积，从而明显抑制肝纤维化的发生。研究结果表明，利用新型超声微泡载体系统介导CTGF amiRNA靶向治疗肝纤维化是一种有效的方法，值得进一步研究。目前该项目研究已投稿国外SCI论文2篇，已发表1篇，修回待发表1篇；参加国际学术交流和全军学术交流各1人次；培养博士生1名；拟再撰写论文2-3篇，申请国家发明专利1项。