超声造影剂微泡靶向介导Her2-siRNA治疗乳腺癌的研究

Her2高表达是乳腺癌恶化的分子标志，RNAi是抑制基因表达的有力武器，Her2-RNAi是治疗Her2阳性乳腺癌及其转移癌的极具潜力的新途径；本项目拟构建适于介导Her2-siRNA治疗乳腺癌的超声微泡靶向运载系统（UTMD 系统），并在体外培养乳腺癌细胞和在体乳腺癌及其转移癌中验证其抑制Her2基因表达的效应；探讨UTMD 系统介导Her2-siRNA对体外培养乳腺癌细胞增殖、迁移能力的影响及其对化疗敏感性的改变，研究其对免疫缺陷SCID鼠的人乳腺癌移植瘤及转移瘤生长、转移的抑制作用及对化疗敏感性的影响。本项目利用微泡造影剂介导Her2-siRNA，通过定向超声辐照，有望提高靶细胞的转染率，减少对"无辜"组织细胞的基因表达干扰，为超声造影开辟新的临床应用奠定实验基础，为RNAi技术治疗乳腺癌及其转移癌提供可安全应用于临床的、高效、无创和重复性好的定向运载系统。

Her-2高表达是乳腺癌恶化的标志，RNA干扰是抑制基因表达的有效工具，在肿瘤治疗方面具有广阔的前景，然而目前缺乏高效无害的基因传递系统，限制了其在临床上的进一步应用。本研究利用超声微泡的空化效应，以PEG-PEI为桥梁，连接超声微泡造影剂SonoVue及siRNA，形成稳固的SonoVue-PEG-PEI-siRNA 聚合物，在超声辐照下辐照乳腺癌细胞SKBR3，优化辐照条件，促进FAM-siRNA（带绿色荧光）转染进入SKBR3,观察其转染效率。结果表明在超声辐照下，SonoVue-PEG-PEI-siRNA组较FAM-siRNA组，SonoVue+FAM-siRNA组，超声辐照+FAM-siRNA组、超声辐照+SonoVue+siRNA组转染效率高。并进一步利用优化的条件转染Her-2-siRNA ，观察SKBR3细胞Her-2基因表达水平。结果表明，SonoVue-PEG-PEI-siRNA组在基因水平上抑制Her-2基因表达较其他组明显提高。