以麻黄汤为例的基于路径分析模型的中药方剂组方原理定量研究

从系统科学的角度出发，我们认为中药通过配伍形成一个由多味药材或多个化学成分组成的药效网络系统，因此提出 "方剂配伍网络效应"的假说。为定量描述配伍网络，拟引入路径分析这一多因多果现代数学工具。麻黄汤组方精当，方中君臣佐使皆备，是研究中药组方原理的较佳例方。现拟以其为似例方，采用正交设计进行方中药味的剂量组合，以发汗和平喘二指标反映方剂整体疗效。将组方药量和药效数据进行路径分析，描绘出多个药味与二药效指标间的总体路径图，用图中各药味的正向系数表示其方剂地位，以药味间网络系数表征七情合和，检验模型图与麻黄汤经典组方理论的吻合度；同时对各处方进行色谱质谱分析，同法描绘各化合物与药效因果的路径图，明确功效分子确定配伍关系；组成功效分子组成的分子层次配伍系统，并对其进行药效学再验证，检验该系统可否表征麻黄汤的物质基础。通过以上两层次的研究，探索饮片和分子两个层次的中药方剂组方原理的现代定量研究方法。

本项目以验证“方剂配伍网络效应”的假说为目标，以经典方剂麻黄汤为实验对象，采用均匀试验和单因素试验设计对麻黄汤进行药味与药量的并行加减，以发汗和平喘为整体药效作用方向的表征指标，建立路径分析数学模型，定量解析麻黄汤的组方原理，同时对路径分析合结构方程在中药复方研究中的适用性作出合理评价。分别采用汗点法和离体气管螺旋条法，先将处方中各味药的用量分别与药效实验结果进行线性拟合，然后分别采用路径分析数学模型对复方中各味药之间以及各味药与药效实验结果之间的相互影响进行相关性分析，探讨药材层面的麻黄汤复方配伍对药效作用的影响。通径系数的计算结果恰与传统中医药理论对麻黄汤的认识——麻黄为君，臣以桂枝，佐使杏仁、甘草有相似之处，体现了采用路径分析数学模型研究中药复方配伍的可行性。同时采用色谱质谱联用技术，对各处方的脂溶性和水溶性部位进行化学成分的定性定量分析，将所得药效数据和各色谱峰峰面积进行因果分析，绘制功效分子层次的路径图，辨识出15个麻黄汤起效的功效分子，探索麻黄汤复方配伍在化学组分层面与药效实验结果间的关系，进而探讨麻黄汤复方配伍中的药材-化学组分-药效相互关系的作用路径。最后分别以麻黄有效成分盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和苦杏仁有效成分苦杏仁苷为例，采用高效液相色谱法测定麻黄汤及不同配伍水煎液中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和苦杏仁苷的含量变化，并与处方中药材用量变化和药效实验结果建立联系。对于盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱的含量测定结果显示，苦杏仁能促进它们在水煎液中的煎出量，但是桂枝、甘草对盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱在复方中的煎出的影响却不显著。对于苦杏仁苷的含量测定结果显示，麻黄、桂枝、甘草的表观影响并不显著。综上所述，借助现代分析和分离技术，以路径分析为解析方法，可以从饮片和功效分子两个水平定量解析麻黄汤的组方原理，引入路径分析的研究方法有助于中药组方规律研究从定性向定量的转变。