登革-日本脑炎嵌合假病毒自组装颗粒的构建及免疫效能研究

登革病毒和日本脑炎病毒均以蚊虫为媒介进行传播，广泛流行于热带与亚热带地区，每年有上亿人感染，死亡率高，严重危害人类健康。目前，对登革热和日本脑炎都缺乏有效的治疗，前者尚无疫苗上市，而后者的预防主要使用减毒活疫苗，有潜在致病风险，且毒副作用大，故新型候选疫苗设计与研究具有重要现实意义。假病毒是不含核酸的病毒空壳结构, 具有很强的免疫原性，而不具有感染性, 是一种极为理想的候选疫苗。本研究根据登革及日本脑炎病毒E蛋白的结构特点及免疫原性分布，以日本脑炎病毒基质蛋白为骨架，融合具有免疫保护功能的截短型登革病毒E蛋白及日本脑炎病毒E蛋白III区，设计嵌合型登革-日本脑炎 (D-J)假病毒；构建表达载体，在细胞中进行假病毒自组装颗粒的形成研究；制备假病毒并进行动物实验，检测抗体产生及细胞因子水平，结合体外中和试验和淋巴细胞增殖实验评价假病毒的免疫效能，为制备新一代嵌合型登革-日本脑炎疫苗奠定基础。

登革病毒和日本脑炎病毒均以蚊虫为媒介进行传播，广泛流行于热带与亚热带地区，每年有上亿人感染，死亡率高，严重危害人类健康。目前，对登革热和日本脑炎都缺乏有效的治疗，前者尚无疫苗上市，而后者的预防主要使用减毒活疫苗，有潜在致病风险，且毒副作用大，故新型候选疫苗设计与研究具有重要现实意义。假病毒是不含核酸的病毒空壳结构, 具有很强的免疫原性，而不具有感染性, 是一种极为理想的候选疫苗。本研究首先对我国流行分离株（GZ2002）进行全基因组测序和生物信息学分析，选择了登革病毒E蛋白III区（EDIII）进行分子克隆和表达，证实EDIII有保护功能；再根据登革病毒及日本脑炎病毒E蛋白的结构特点及免疫原性分布，以登革病毒基质蛋白为骨架，融合具有免疫保护功能的截短型登革病毒E蛋白及日本脑炎病毒E蛋白III区，设计嵌合型登革-日本脑炎 (D-J)假病毒，构建了表达载体，转染细胞，并在细胞中进行假病毒自组装颗粒的形成研究，获得了假病毒颗粒；利用制备的假病毒进行动物实验免疫，获得了抗体，并利用体外中和体内乳鼠保护实验评价假病毒的免疫保护效能，为制备新一代嵌合型登革-日本脑炎疫苗奠定了基础。发表论著8篇，其中SCI收录期刊论文4篇，申请国家发明专利2项，参加全国、地区性学术会议论文4篇，培养研究生2名。