p85a在UVR诱导的细胞损伤过程中调控p53乙酰化修饰反应及转录激活功能机制研究

p53是一种能够在细胞应激损伤条件下介导细胞凋亡等关键生物学效应的转录因子,其功能调控涉及泛素化、磷酸化、乙酰化、甲基化等多种翻译后修饰反应。其中,近几年被发现的在组蛋白乙酰基转移酶(HATs)催化作用下完成的乙酰化反应在p53功能执行中具有关键作用,因此有关乙酰化反应的调控机制研究是当今p53领域的热点内容。申请人在留美工作期间,首次揭示了蛋白激酶PI-3K调节亚基p85a具有不依赖于PI-3K激酶活性独立介导紫外线辐射(UVR)诱导的细胞凋亡效应的新功能。在回国后的后续机制研究中,申请人发现p85a能够在UVR反应中特异性调控p53乙酰化修饰反应及其转录激活功能,但对其泛素化和主要Ser/Thr位点上的磷酸化反应没有影响。因此本项目拟定从"揭示参与p53乙酰化反应调控的HATs与p85a之间的直接或间接作用模式"为起点,阐明p85a特异性调控p53乙酰化反应的分子机制及其生物学意义。

1.按照课题任务书计划完成全部研究内容，研究结果发表于Oncogene(影响因子7.414）并得到了国内多家研究机构和媒体的广泛关注。.申请人在以往工作中证实了PI-3K调节亚基p85a能够不依赖于PI-3K激酶活性独立介导UVB反应中p53的诱导活化；而且这种作用主要与p53在K370位的乙酰化修饰反应相关。因此本研究主要探讨了p85a调控UVB诱导p53位点特异性乙酰化修饰反应的分子机制。研究结果表明：p85a在UVB反应中能够与催化p53在K370位发生乙酰化修饰反应的乙酰基转移酶p300发生诱导性结合反应，从而促进p300与p53结合并共同转位入细胞核，结合于凋亡反应促进型p53下游靶基因PERP的启动子区域，诱导PERP表达而介导UVB刺激作用下的促细胞凋亡效应。以上研究结果不仅进一步丰富了本课题组长期关注的“p85a单体介导细胞应激损伤反应分子机制"的认识，同时也为”p53的乙酰化信号转导网络“增添了新成员。.2.在课题执行过程中发现新线索，对课题内容进行了深度拓展，并取得重要结果；数据整理论文投稿于EMBO Reports（影响因子7.355）。. 在本年度研究中我们又发现了p85a对p53-Ser6(小鼠Ser9)磷酸化修饰反应的调控作用。进一步机制研究中发现了p85a/CK1d/p53-Ser6-P是p85a调控p53诱导活化并介导促细胞凋亡反应的新途径。