鼻咽癌特异性核酸适配体及蛋白质分子标志物的筛选和鉴定

鼻咽癌在中国南方高发，目前尚无有效的早期诊断方法，可用于靶向治疗的目标分子也十分有限。核酸适配体是由单链寡核苷酸折叠而成的一类新型识别分子，与抗体相比具有易于合成和保存、易于修饰、毒性和免疫原性小等优点，其与蛋白质等靶标结合的特异性和亲合力与抗原抗体相当甚至更强。本项目拟用鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系CNE2和基于细胞的指数富集配体系统进化法（Cell-SELEX）筛选鼻咽癌细胞特异的核酸适配体探针，用其它鼻咽癌细胞系和鼻咽癌组织进行验证并建立该恶性肿瘤体系的特征核酸适配体分子识别指纹图谱，利用所得的核酸适配体探针分离鉴定鼻咽癌相关的蛋白质分子标志物并进行其在鼻咽癌中的表达和功能分析，以期为鼻咽癌的早期诊断、分子分型和靶向治疗提供新的方法，为了解鼻咽癌发生、发展过程中的分子机理提供新的线索。

鼻咽癌是高发于中国南方的一类致死性恶性肿瘤，目前还没有有效的早期诊断方法，也几乎没有可用于治疗的靶向分子。核酸适配体由较短的单链寡核苷酸折叠而成，可以识别蛋白质乃至整体细胞等，其特异性和亲合力与抗原抗体相当甚至更强。人工合成的核酸适配体与自然生成的抗体相比具有很多的优越性，如易于合成和保存、易于修饰以利于不同的诊断和治疗目的、没有毒性和免疫原性等。本项目拟用鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系CNE2和基于细胞的指数富集配体系统进化法筛选鼻咽癌细胞特异的核酸适配体探针，用其他鼻咽癌细胞系和鼻咽癌组织进行验证并建立该恶性肿瘤体系的特征核酸适配体分子识别指纹图谱。由于在实验的过程中CNE2细胞系发生了污染，我们改用高成瘤、高转移的5-8F细胞系作为目标细胞，用高成瘤、不转移的6-10B细胞系作为负筛选细胞，筛选鼻咽癌转移相关的核酸适配体，目前已进行了5轮筛选。同时，用C666-1细胞与NP69细胞进行鼻咽癌相关的核酸适配体筛选，目前正在进行细胞培养。在最终得到核酸适配体后，我们将利用所得的核酸适配体探针分离鉴定鼻咽癌相关或鼻咽癌转移相关的蛋白质标志物并进行功能分析，以期为鼻咽癌的早期诊断、分子分型和靶向治疗提供新的方法，为了解鼻咽癌发生、发展过程中的分子变化提供新的线索。