雷公藤甲素抑制DSA产生和M1活化防治肾移植体液性排斥及机制研究

Antibody mediated humoral rejection (AMR) is the predominant cause for renal allograft dysfunction. Our preliminary studies and other reports demonstrated that donor specific antibody (DSA) development and macrophage-1(M1) activation played an important role in this process. Triptolide (Trip) can treat antibody associated IgA nephropathy and lupus nephritis. Trip inhibits M1 cytokines, metabolites and transcription factors in vivo and vitro. However, it is still unknown whether Trip can inhibit DSA development and M1 activation, the mechanisms of inhibition or its therapeutic effects on renal allograft AMR. Our previous and preliminary results showed that Trip can suppress DSA development and M1 activation, and own a preventing and treating effects on renal allograft AMR. In this proposal, the donor skin transplantation presensitized acute AMR in mouse renal transplantation models, mouse peritoneal macrophages, histological pathology, flow cytometry, immunochemistry, immunofluorescence, RT-qPCR, et al. were used to investigate the effects of Trip on DSA development and M1 activation. The detailed mechanisms of inhibition were also analyzed while investigating the therapeutic effects. This project will provide a new preventing mean and treatment for renal allograft AMR.

抗体介导的体液性排斥（AMR）是导致移植肾失功的首要原因。国外报道和我们前期研究证实，抗供体特异性抗体（DSA）产生和巨噬细胞向M1型活化在其中起重要作用。雷公藤甲素（Trip）能治疗抗体相关性IgA肾病和狼疮性肾炎，体内/体外均抑制M1型巨噬细胞细胞因子、代谢产物和转录因子。然而Trip能否抑制DSA产生，抑制M1型巨噬细胞活化，其具体机制及对肾移植AMR疗效如何，目前尚不清楚。我们前期研究和预实验结果提示Trip能抑制DSA产生和M1活化，对肾移植AMR有防治效果。本研究采用供体皮肤移植预致敏受体建立的小鼠肾移植急性AMR动物模型和小鼠腹腔来源巨噬细胞，在整体疾病模型和体外细胞水平，结合组织病理学、流式细胞、免疫组化、免疫荧光、RT-qPCR等方法研究Trip对DSA产生和M1活化的作用，观察对肾移植AMR疗效的同时分析产生抑制效果的具体机制。本研究将为肾移植AMR提供新的防治手段。

体液性排斥（AMR）是影响移植肾存活的主要原因。针对移植肾AMR的治疗策略有限，疗效欠理想。AMR疾病模型是开展AMR相关研究的重要工具，但仍然欠缺更符合临床肾移植AMR特点的小鼠移植肾AMR模型。本项目围绕小鼠移植肾AMR疾病动物模型、发生机制、治疗策略进行深入研究，取得一系列原创性研究成果。项目资助期间发表2篇SCI论文（Am J Transplant, IF 7.163; Front Immunol, IF 4.716），1篇中文核心期刊论文(中华实验外科杂志)，申请国内专利受理1项。项目研究结果在美国移植年会壁报展示3次；中华医学会器官移植年会壁报展示1次，分组会议报告1次；中国医师协会器官移植医师年会分组会议报告1次；移植肾脏病岭南论坛特邀报告1次；雷公藤移植领域应用研讨会特邀报告1次。主要研究成果包括：改良了小鼠移植肾AMR疾病模型，使其更接近临床特点和具有更好的实用性；揭示雷公藤甲素抑制移植受体体内抗供体特异性抗体（DSA）的产生，同时减少AMR移植肾内T细胞、B细胞、NK细胞和巨噬细胞浸润，进而抑制AMR导致的移植肾损伤并改善移植肾存活。项目研究结果促进了实验室利用小鼠肾移植AMR疾病模型开展AMR相关研究，对临床应用雷公藤治疗移植肾AMR提供了有力证据支持，为移植肾AMR提供了新的治疗策略，有利于改善临床肾移植疗效。