透明颤菌血红蛋白基因在丝状真菌中的克隆与表达

本研究工作完善并优化了头孢菌素C（cpc）工业生产菌顶头孢霉菌原生质体制备和再生的条件。以来自于构巢曲霉的Trpc启动子构建了含有透明颤菌（Vitreoscilla）血红蛋白基因（Vgb）的杂合质粒pYG715/Vgb，并通过原生质体转化和博莱霉素抗生筛选成功地导入工业顶头孢霉菌，经Southern blotting 等分析证明质粒整合进顶头孢霉菌的染色体DNA中。通过Westem blotting 及CO差光谱分析证实VHb在顶头孢霉菌中表达且具有生物活性。摇瓶发酵试验表明：带有Vgb基因的顶头孢霉菌合成CPC的能力在遥瓶培养装量20ml和40ml条件下分别比对照菌株（Vgb-）提高了30%和110%左右，表明VHb基因的克隆工业微生物发酵的节能和提高产量方面有着潜在的广泛应用前景。