苹果醇酰基转移酶基因响应胁迫信号的转录调控机制研究

苹果醇酰基转移酶（MdAAT）是酯类挥发性成分合成途径最末端的关键酶，调控果实的风味品质。本课题组前期研究发现，该酶也参与了对胁迫信号的响应。为了更全面地揭示该基因的生物学功能，本研究拟采用Tail-PCR技术分离三个MdAAT基因启动子，构建GUS融合表达载体转化烟草，通过不同信号分子和胁迫处理找到三个基因主要参与了何种胁迫信号的响应；应用缺失和点突变技术分析三个启动子差异序列和乙烯、水杨酸、茉莉酸甲酯等信号相关顺式作用元件的调控机制，筛选出响应胁迫信号的主要调控序列；以该序列为诱饵，利用酵母单杂交技术筛选相关转录因子；利用EMSA、GFP融合表达等技术分析转录因子结合特性，通过共转化、Real Time PCR等技术分析转录因子的生物学功能。通过以上研究，初步阐明MdAAT基因转录的调控机制及信号转导途径，为果品品质调控和提高抗逆性提供理论依据和研究方法。