表皮生长因子受体异构体EGFRvA对HNRNPF的调控和机制研究

The epidermal growth factor receptor (EGFR) is an important transmemebrane protein receptor, which has been reported to play important roles in the progression and development of various maligancies. Though EGFR-targeted drugs have been approved for treating various cancer types, the function and mechanism of EGFR are still far from clear. Recently, we identified one new EGFR isoform called EGFRvA. Our study revealed that EGFRvA confered more increased invasiveness to cancer than EGFR. Given that EGFRvA contains a novel sequence at C-terminus, it is likely to directly regulate some proteins.Therefore, tandom affinity purification (TAP), mass spectrometry analysis as well as co-immunoprecipitation were applied to screen the proteins interacting with EGFRvA. Interestingly, HNRNPF, one protein for mRNA regulation, was observed to be able to interact with EGFRvA specifically. On these basis, we are going to further elucidate the regulatory role of EGFRvA on HNRNPF as well as its underlying mechanisms. Through this study, it is possible to uncover new signaling pathways mediated by EGFRvA and discover new EGFRvA functions in tumor progression and development, thereby expanding the current knowledge of EGFR and providing new strategies and theoretical basis for EGFR-targeted cancer therapy.

表皮生长因子受体(EGFR)是一种重要的跨膜受体，在多种恶性肿瘤的发生发展中扮演了关键的角色。虽然EGFR靶向药物已成功用于多种肿瘤治疗,但关于EGFR的功能和机理尚不完全清楚。最近，本课题组首次发现了一种新的EGFR 异构体EGFRvA并证实它具有比EGFR更强的促进肿瘤迁移侵袭能力。由于EGFRvA含有独特的羧基末端，因此它很可能特异性地参与某些蛋白的直接调控。本实验室利用TAP串联亲和纯化与质谱的方法对EGFRvA相互作用蛋白做了筛选并通过免疫共沉淀方法进行验证，最终确定了mRNA调控蛋白HNRNPF可以与EGFRvA发生特异性的相互作用。本项目将在这一基础上深入研究肿瘤中EGFRvA对HNRNPF的调控作用及分子机制，揭示EGFRvA调控的新信号通路及其参与肿瘤发生发展的新作用，从而拓展对EGFR的已有认识，也为肿瘤的EGFR靶向治疗提供新的思路和理论依据。

表皮生长因子受体是具有酪氨酸激酶活性的跨膜蛋白，在肿瘤中过表达或者变异体表达往往促进肿瘤生长和产生耐药性。最近本课题组发现了一种新的表皮生长因子异构体并命名为EGFRvA，EGFRvA与EGFR相比更加能够促进肿瘤细胞的侵袭迁移。本项目主要研究EGFRvA的相关作用机理及与EGFR不同的功能作用途径，主要完成以下研究：.1、利用TAP 串联亲和纯化与质谱的方法对EGFRvA相互作用蛋白做了筛选并通过免疫共沉淀方法进行验证，最终确定了mRNA 调控蛋白HNRNPF可以与EGFRvA 发生特异性的相互作用。我们的结果显示EGFRvA不能很好介导HNRFP磷酸化，对其表达没有明显的调控作用。.2、同时还还开展了EGFRvA的生理功能及分子机制研究。EGFRvA过表达可以促进人脑星形胶质母细胞瘤U87MG细胞的迁移，它可以通过影响肿瘤细胞中FBLN2、ROBO1、CDH13和SOX2基因的表达来发挥作用。EGFRvA由于与E3泛素连接酶的结合作用减弱而导致其蛋白不易进入降解途径，蛋白稳定性增强，成为EGFRvA促进肿瘤细胞的侵袭迁移的调控新机制。通过和EGFR相对比，发现了EGFRvA不同于EGFR的作用机理（FEBS Lett. 2016，590(9):1345-53）。.3、EGFR与TfR1或SCD1相互作用调节细胞内内代谢途径研究。研究结果还显示EGFR 酪氨酸磷酸化水平对非小细胞肺癌的铁稳态有直接调控作用。EGFR 能够与TfR1 直接相互作用，在酪氨酸激酶活性下调时，减少膜上TfR1 的分布，使得细胞转运铁的能力下降，细胞不能获得足够的铁离子发生细胞周期阻滞和增殖抑制，补充铁可以部分恢复这种抑制效果。（Cancer Letters. 2016, 381: 331-340）