重组ADAMTS13对减少溶栓酶tPA诱导的脑出血和神经细胞损伤的作用和机制研究

溶栓酶tPA是目前公认的最有效治疗急性脑中风的药物，但短暂的治疗时间窗以及增加脑出血和诱导神经毒性等副作用限制了其临床应用。我们前期的研究显示金属蛋白酶ADAMTS13基因缺失导致脑缺血病灶明显增大，而重组ADAMTS13则显著减轻脑缺血损伤。本课题组进一步的研究发现脑缺血引起ADAMTS13在缺血半暗带血管内皮细胞的表达明显增加，而且重组ADAMTS13显著降低低氧再氧化状态下tPA引起的培养神经元的死亡率。本项目采用体内外实验相结合的方法，以介导神经细胞死的关键信号分子和炎症因子为靶点，研究ADAMTS13对减少tPA诱导神经细胞损伤的作用机制；研究脑血管内皮细胞基底膜成分、血管通透性相关分子等信号通路在tPA诱导的脑出血中的作用；初步阐明重组ADAMTS13对tPA破坏血脑屏障通透性和诱导脑出血的作用和机制，从而为扩展tPA的治疗时间窗，提高tPA的临床应用价值提供新的策略和手段。

摘要:.本项目基本确保了研究内容的完成，达到了预期目标，取得了比较有价值的研究进展。在本次国家自然基金的支持下，本项目的研究发现脑内注入ADAMTS13底物VWF因子能够模拟tPA所引起的血脑屏障通透性的增加。相反，重组ADAMTS13可逆转脑内注入tPA所引起的血脑屏障开放。并且，重组ADAMTS13可显著减轻tPA对脑缺血后血脑屏障的破坏作用，从而有效抑制tPA引起的脑出血。我们进一步证明重组ADAMTS13降低因tPA所致血管通透性分子VEGF的过量表达，减轻血脑屏障基底膜蛋白和紧密连接蛋白的降解。选择性抑制Rho/ROCK或Akt能够阻断tPA的这些作用，并且重组ADAMTS13显著降低tPA所引起的RhoA激活和Akt的过度磷酸化。这些结果证明重组ADAMTS13通过抑制RhoA和Akt介导的脑血管通透性增加,减少tPA 溶栓引起的脑出血。相关论文发表在神经科学领域权威杂志Annals of Neurology / 影响因子11.193）上。.另一方面，采用体内和体外实验，我们发现重组ADAMTS13可减少tPA对脑缺血后神经元的毒性作用,并延长tPA的治疗时间窗;这一作用可能与重组ADAMTS13对MAPK家族蛋白pERK1/2的调节有关,而pJNK和p38并未参与其中。目前研究已经进入收尾阶段。.已发表受本基金资助的通讯作者SCI论文2篇 (Annals of Neurology、Stem Cells), 待发表受本基金资助的通讯作者论文3篇。