白花蛇舌草调控肠道肿瘤Wnt信号通路的研究

Wnt信号通路与肿瘤发生发展密切相关，当Wnt信号通路被配基激活时，β-连环蛋白不能被胞浆APC/GSK-3β/Axin复合体降解，而蓄积并转入核内，与TCF/LEF转录因子结合，启动肿瘤基因表达。当肿瘤抑制基因APC突变失活时，APC/GSK-3β/Axin复合体不能形成，β-连环蛋白也不被降解而引发肿瘤。白花蛇舌草清热解毒，消痈散结，治疗肿瘤疗效卓著。我们前期研究发现白花蛇舌草可下调结肠癌SW480细胞核β-连环蛋白水平而抗肿瘤。本项目以APC截断突变失活的自发生长肠道肿瘤的基因工程APC(Min/+）小鼠和SW480细胞、含完整APC的结肠癌细胞HCT116、自建APC基因稳定沉默的HCT116细胞（HCT116oAPC-）为模型，研究白花蛇舌草对肠道肿瘤Wnt信号通路的影响，揭示其调控肠道肿瘤Wnt信号通路的机理，为白花蛇舌草治疗肿瘤提供科学的实验基础和新的治疗理论。

Wnt信号通路与肿瘤发生发展密切相关。白花蛇舌草清热解毒、消痈散结，治疗肿瘤疗效卓著。我们前期研究发现白花蛇舌草可下调结肠癌SW480细胞核β-连环蛋白水平而抗肿瘤。但白花蛇舌草对Wnt信号通路的影响则不清楚。我们以APC截断突变失活的自发生长肠道肿瘤的基因工程APC(Min/+)小鼠为动物模型，研究了白花蛇舌草体内抗肠道肿瘤作用，及其对体内肿瘤Wnt信号通路的调控机制。我们发现白花蛇舌草可以剂量依赖性地抑制APC(Min/+)小鼠肠道肿瘤发生，并降低APCMin/+小鼠肠道β-catenin、c-Myc和cyclin D1 mRNA和蛋白水平，提高APC和GSK-3β mRNA和蛋白表达。我们以SW480细胞、含完整APC的结肠癌细胞HCT116、自建APC基因稳定沉默的HCT116细胞（HCT116•APC-）为细胞模型，研究了白花蛇舌草体外抗肠道肿瘤作用，及其对体外肿瘤细胞Wnt信号通路的调控机制。我们发现白花蛇舌草可以剂量依赖性地降低肿瘤细胞的β-catenin、c-Myc和cyclin D1 mRNA和蛋白水平，提高APC和GSK-3β mRNA和蛋白表达；促进APC蛋白与β-catenin蛋白结合；提高GSK-3β活性；促进β-catenin磷酸化；减少截断突变型APC蛋白含量；抑制重组蛋白β-catenin与TCF4结合；抑制TCF4蛋白与Wnt信号通路靶基因启动子DNA共有核心基序（motif）结合；抑制c-Myc启动子和cyclin D1启动子活性；抑制β-catenin/TCF/LEF介导的靶基因转录；抑制SW480细胞、HCT116细胞和HCT116•APC-细胞增殖、转化、侵袭。本项目揭示了白花蛇舌草对肠道肿瘤Wnt 信号通路的影响及其调控机制，为白花蛇舌草治疗肿瘤提供科学的实验基础和新的治疗理论。