Mir-21参与TSH调控巨噬细胞M1极化促进动脉粥样硬化的分子机制

Epidemiology data shows that subclinical hypothyroidism was associated with atherosclerosis incidence. Our group have found that the TSH level was positively correlated with the plaque thickness ， mir-21 level was elevated in the serum from patients with subclinical hypothyroidism, the plaque area and M1 cytokines factors decreased in the TSHR knockout mice after high fat diet treatment, no research on the mechanism has been reported. This study takes TSH as the starting point, macrophage as the object of research, combines in vivo study(high fat diet treatment of TSHR gene knockout mice, bone marrow transplantation mice, in vivo RNA interference) and in vitro study(TSH treatment, gene overexpression and silence,CHIP,Luciferase Assay), tries to clarify the mechanisms of how TSH induces the M1 polariztion of macrophages via STAT3/mir-21/PTEN/NF-kB pathway and provides new insights into the roles of TSH plays in the incidence and progress of atherosclerosis.

流行病学资料显示，TSH是动脉粥样硬化的独立危险因素。我们前期临床研究发现TSH水平与动脉粥样硬化斑块厚度呈正相关，而且亚临床甲减患者TSH与mir-21增加有关；TSH受体敲除小鼠高脂喂养后动脉粥样硬化斑块面积减少，缺少TSH受体的巨噬细胞在TSH处理后M1型极化减弱，然而至今国内外对此尚无报道。本项目由TSH切入,以促进动脉粥样硬化的巨噬细胞为主要研究对象，应用体内实验（在TSHR基因敲除小鼠，骨髓移植，体内RNA干扰等多种动物模型）和体外实验（TSH刺激巨噬细胞，基因沉默和过表达，染色质免疫共沉淀，荧光素酶报告基因等技术）相结合的方法，阐明TSH通过STAT3/mir-21/PTEN/NF-kB通路诱导巨噬细胞M1型极化的作用及分子机制，为揭示TSH在动脉粥样硬化发生发展中的作用提供新思路。

流行病学调查显示，TSH是动脉粥样硬化的独立危险因素。本项目通过构建转基因动物以及骨髓移植模型，通过体内体外实验，运用组织学，分子生物学，细胞生物学等技术手段，对TSH诱发动脉硬化的机制进行了深入研究。通过构建TSHR和ApoE双敲除鼠，证明了TSHR全身敲除可以减轻动脉粥样硬化，减少斑块内巨噬细胞数量，减低斑块内IL-1b，IL-6，TNF-a，MCP-1等促炎因子的转录水平；骨髓移植模型证明仅有造血系统TSHR缺失即可减轻动脉粥样硬化斑块形成，细胞实验证明巨噬细胞细胞膜存在TSH受体，且TSH可以促进巨噬细胞促炎因子释放，其中机制为TSH促进IκB磷酸化，进而促进IκB降解，从而激活NF-κB，使其活化并入核，启动促炎因子转录。本课题第二部分构建了亚临床甲减的小鼠模型，并对其肝脏进行了脂代谢相关miRNAs表达水平检测以及蛋白质组学检测，并预测miRNAs和蛋白质的作用模块。本研究为TSH促进动脉粥样硬化提供了新的研究视角，对动脉粥样硬化的治疗提供了新的线索和靶点。项目已发表文章3篇，待发表一篇。培养研究生2名，其中一名硕士生已经取得学位。项目获得经费资助18万元，支出128535元，剩余经费计划用于本项目后续研究支出。