FR靶向性NFPA诊断、治疗及相关机制研究

无功能垂体腺瘤（NFPA）缺乏特异性诊断指标及治疗药物。研究证实叶酸受体α（FRα）在人NFPA细胞上特异性高表达，利用肿瘤细胞表面特异性标志进行显影剂或治疗药物的靶向投递利于疾病诊断并提高药物疗效、降低药物副作用。目前FRα介导的肿瘤靶向显影及药物转运技术在卵巢癌、非小细胞肺癌和肾细胞癌中已日臻成熟。本项目拟通过检测各亚型垂体腺瘤中FRα和外周血游离FRα表达水平，探讨FRα作为NFPA特异性肿瘤标志物及诊疗靶点的可行性；在人无功能垂体肿瘤细胞培养基础上，探究FRα靶向药物EC17和EC145对垂体腺瘤细胞增殖的无功能垂体腺瘤（NFPA）缺乏特抑制作用及可能机制；建立裸鼠无功能垂体腺瘤在体模型,检测显影剂显影剂EC20和111In-DTPA-folate对NFPA的靶向显像效果；通过CED方式输注EC17和EC145治疗裸鼠NFPA模型，评价FRα靶向性药物对在体垂体腺瘤的疗效及安全性。

无功能垂体腺瘤（NFPA）缺乏特异性诊断指标及治疗药物。本课题组于2011年起，承担了国家自然科学基金面上项目《FR靶向性NFPA诊断、治疗及相关机制研究》。.2011年1月-2011年12月，完成第一部分：FR 在垂体腺瘤和正常垂体中的表达及其与无功能垂体腺瘤之间的关系：.选取76 例不同类型的垂体腺瘤标本和5 例正常垂体，用IHC 和PCR 定性定量检测FR 的表达，发现FRα仅在NFPA中特异性高表达，在其他类型的垂体腺瘤和正常腺垂体中不表达，表达水平与NFPA侵袭性、Ki-67、肿瘤大小存在显著相关性，因此，FRα可能作为NFPA特异性的诊断和判断侵袭性的指标，并为肿瘤的靶向诊治提供理论基础。.2012年1月-2012年12月，完成课题第二部分：叶酸受体靶向阿霉素脂质体对人原代垂体腺瘤细胞的效用及机制：.选取25例人垂体腺瘤进行原代细胞培养，与叶酸靶向显影剂F-L-calcein、L-calcein、游离calcein及F-L-calcein加1mM游离叶酸共孵育，观察各类型肿瘤细胞摄取各型calcein的能力。发现：在高表达FRα的NFPA中，叶酸靶向显影剂F-L-calcein可以通过FRα更好地被NFPA细胞内吞，且内吞作用能被1mM游离叶酸阻断。并且，在高表达FRα的NFPA中， 相比非靶向的L-DOX，F-L-DOX通过激活caspase-8的和caspase-9和caspase-3/7，更有效地抑制肿瘤的生长和促进细胞的凋亡。同时，F-L-DOX通过抑制MMP-2和MMP-9分泌，更有效地拮抗肿瘤的侵袭能力。相反，游离叶酸可以拮抗其作用。研究结果表明，FRα在此过程中发挥了关键作用。.2013年1月-2013年12月，完成课题第三部分：叶酸靶向阿霉素脂质体对裸鼠移植性人宫颈癌疗效研究：因目前尚不能建立裸鼠移植性人无功能垂体腺瘤模型，我们利用荷人宫颈癌的裸鼠为动物模型，随机分为对照组（NS组）、游离DOX组、L-DOX组和F-L-DOX组，叶酸靶向阿霉素脂质体组（F-L-DOX）对人宫颈癌的移植瘤有显著抑制作用，显著高于非靶向阿霉素脂质体组、游离阿霉素组,初步做到了“增效减负”，作为一种新型抗FR过表达肿瘤的靶向药物显示了良好的应用前景。