ING3：原发性肝癌的诊断与治疗新靶点

ING3, a novel tumor-suppressor, has been shown to be involved in tumor transcriptional regulation, apoptosis, cell cycle，chromatin remodeling, and activation of cell signlalling pathways. Some studies have demonstrated that ING3 is dysregulated in several types of cancers. However, the role of ING3 in primary hepatic cancer (PHC) remains largely unclear. In the present research, we aimed to investigate the expression, function and molecular mechnism of ING3 protein in PHC. The research includes three parts: 1. Investigating the expression, clinical significance and inactivation mechnism of ING3 in PHC. 2. Observing the biological behaviour changing of hepatic cancer cells after ING3 ectopic expression and silencing in vivo and vitro. 3. Screening the upstream and downstream proteins by protein microarray and prooving ING3 plays roles in hepatic cancer cells through regulating downstream proteins and their mediated signal transduction pathways, then screening the mircroRNAs regulated by ING3 with the method of Real-time PCR microarray analysis and finnally confirming the molecular mechanisms of ING3 in PHC. The success of this research will provide a new diagnostic marker and a potential molecular therapeutic target for PHC.

ING3是新发现的候选抑癌基因，在多种人类肿瘤中表达失调。已发现ING3影响肿瘤细胞增殖与凋亡、调节染色体构象、调控基因表达，影响P53及细胞信号通路活性，但在原发性肝癌中的研究还未见报道。本研究欲探讨ING3在原发性肝癌中的表达、功能及其作用机理，包括以下内容：一、研究ING3在原发性肝癌中的表达及临床意义，进而研究ING3在原发性肝癌中表达失调的机制；二、肝癌细胞中ING3的异位表达与沉默，通过体外和体内研究观察ING3过表达或沉默后，肝癌细胞的生物学行为变化，探讨其在原发性肝癌中的功能。三、通过蛋白质芯片筛选ING3的上下游蛋白，进而结合功能实验，验证ING3的上下游蛋白及其介导的信号转导通路，通过Real-time PCR芯片研究ING3调控的microRNA，最终明确ING3在原发性肝癌中作用的分子机理。本课题研究成功，将为原发性肝癌提供新的诊断学指标和分子治疗靶点。

ING3候选抑癌基因，在多种人类肿瘤中表达失调。已发现ING3影响肿瘤细胞增殖与凋亡、调节染色体构象、调控基因表达，影响P53及细胞信号通路活性，但在原发性肝癌中的研究还未见报道。本研究着重探讨了ING3在原发性肝癌中的表达、功能及其作用机理，包括以下内容：一、研究ING3在原发性肝癌中的表达及临床意义，进而研究ING3在原发性肝癌中表达失调的机制；二、肝癌细胞中ING3的异位表达与沉默，通过体外和体内研究观察ING3过表达或沉默后，肝癌细胞的生物学行为变化，探讨其在原发性肝癌中的功能。三、最终明确ING3在原发性肝癌中作用的分子机理。同时在研究中发现肿瘤相关基因HIC1在肝癌中的超甲基化可以使其基因表达下调进而影响肝癌患者的预后。.研究发现ING3在肝癌中显著下调，且ING3表达与肿瘤大小和临床分期呈负相关，说明ING3可能抑制肝癌细胞的发生和发展。ING3在转录水平表达失调。异位表达或沉默ING3在肝癌细胞中的表达，我们发现ING3在肝癌细胞中的表达对细胞增殖并无直接的影响。但应用TNF-α诱导肝癌细胞凋亡后，异位表达ING3基因可以显著促进TNF-α诱导肝癌细胞凋亡；特异性沉默ING3基因表达后可以显著抑制TNF-α诱导肝癌细胞凋亡。ING3对TNF-α诱导肝癌细胞凋亡主要通过对NF-κB信号通路活性的影响实现的。同时研究过程中还发现另一个肿瘤相关基因HIC1在原发性肝癌中因超甲基化表达下调，HIC1表达下调与肝癌预后有关，HIC1抑制原发性肝癌的进展。.肝癌发病机制复杂，调控一个基因往往很难达到抑制肿瘤增殖的目的，在本课题进行中，发现ING3与HIC1相互作用，共同抑制两个基因可以使抑癌效果增强，本研究的意义在于验证新发现的候选抑癌基因ING3在原发性肝癌中的表达、功能、作用机制及其临床意义，且与HIC1相关。这位原发性肝癌提供了新的分子治疗靶点，当然后续仍有许多问题需要深入研究解决。