PCOS胰岛素抵抗（痰浊）病因学研究及苍附导痰汤的疗效机制

Both metabolic abnormalities and reproductive dysfunction are exist in polycystic ovary syndrome(PCOS), insulin resistant is the key mediator. Although, some studies in vitro show that insulin resistant and metabolic abnormalities appear within local ovary and peripheral tissues, but the mechanism and their links to PCOS are not fully understood. In this study, we elucidated whether local ovarian insulin resistance or peripheral insulin resistance or both of them modulates the developmental progression of reproductive abnormalities resembling that of women with PCOS and what is the mechanism by the use of reciprocal ovarian transfer technique in vivo. The key protein molecular of PI-3K/Akt and MAPK pathway were detected within skeletal muscle, adipose tissue and ovary to confirm which tissue IR contribute to PCOS phenotype and what is the mechanism. Chinese medicine appears an significant advantage in PCOS treatment, but, what is the effect mechanism and which is the aim tissue are not clear. In current study, we treat the animal model of PCOS with CFDTT(cangfudaotantang) and elucidated what is the mechanism and aim tissue. It will supply a scientific evidence to clinical treatment to PCOS by using CFDTT.

PCOS是代谢异常与生殖障碍并存的疾病，胰岛素抵抗(IR, 痰浊)在PCOS的发生中起到重要作用。大量体外研究表明PCOS外周和卵巢局部存在IR和代谢异常，但究竟是外周IR还是卵巢局部IR导致PCOS的发生？或是二者协同作用导致PCOS的发生？其机制又是什么？目前并不清楚。因此，本研究运用卵巢原位移植技术构建卵巢局部IR，外周IR和卵巢与外周同时存在IR的三种动物模型，评估各模型的生殖表型和代谢表型，检测各模型肌肉、脂肪和卵巢组织PI-3K/Akt及MAPK信号通路关键分子蛋白表达的变化，探讨不同组织IR在PCOS发生中的作用及机制。中医药在治疗PCOS方面存在显著的疗效优势，中药经方苍附导痰汤用于PCOS的临床治疗，每获良效，但对于其作用的靶组织及机制尚不清楚，故本研究中给予上述动物模型苍附导痰汤治疗，评估其疗效、作用靶组织及作用的分子机制。为临床应用苍附导痰汤治疗PCOS提供科学依据。

PCOS是代谢异常与生殖障碍并存的疾病，胰岛素抵抗(IR, 痰浊)在PCOS的发生中起到重要作用。大量体外研究表明PCOS外周和卵巢局部存在IR和代谢异常，但究竟是外周IR还是卵巢局部IR导致PCOS的发生？或是二者协同作用导致了PCOS的发生？其机制又是什么？目前并不清楚。因此，本研究运用卵巢原位移植技术构建卵巢局部IR，外周IR和卵巢与外周同时存在IR的三种动物模型，评估各模型的生殖表型和代谢表型，检测各模型卵巢组织PI-3K/Akt及MAPK信号通路关键分子蛋白表达的变化，探讨IR在PCOS发生中的作用及机制。中药经方苍附导痰汤用于PCOS的临床治疗，每获良效，但对于其作用的靶组织及机制尚不清楚，故本研究中给予PCOS动物模型苍附导痰汤治疗，评估其疗效、作用靶组织及作用的分子机。本研究选用雌性Akt2-/-小鼠及同窝出生的雌性Akt2+/+小鼠进行卵巢交互移植，构建不同Akt2基因型组合，A组（躯体+，卵巢+），B组（躯体＋，卵巢－），C组（躯体－，卵巢＋），D组（躯体－,卵巢－）。结果发现Akt2基因缺失小鼠与野生型小鼠相比卵巢局部存在胰岛素抵抗；B、D组小鼠动情周期显著延长；C、D组小鼠血糖、血脂及胰岛素水平明显高于A、B组；B、D组17-OH的水平显著高于A、C组，但黄体数量明显减少，窦卵泡数量明显增多；Cyp17mRNA B、D组表达明显高于A、C组；Western Blot 检测，Gsk3β及p-Erk1/2 在B、D组中的表达量显著高于A、C组，而p-Gsk3βA、C组显著高于B、D组。说明Akt2基因缺失小鼠卵巢存在胰岛素抵抗，卵巢局部Akt2基因缺失小鼠出现动情周期延长，卵巢多囊性改变、雄激素及其相关合成酶的水平增高，类似PCOS表现。2、Akt2基因缺失引起卵巢局部胰岛素抵抗的分子机制为Gsk3β蛋白表达及其磷酸化水平的异常。3、其生殖内分泌异常的分子机制为，胰岛素PI3K途径受阻，引起MAPK途径放大。给予苍附导痰汤治疗后PCOS模式动物雄激素，胰岛素及血糖血脂水平均明显降低。说明苍附导痰汤可以显著降低PCOS模式动物卵巢雄激素水平，改善其糖脂代谢水平。