新型靶点分子LCN-2参与PCOS的发生机制及加味苍附导痰汤干预探讨研究

The main pathological features of polycystic ovary syndrome (PCOS) are Hyperandrogenemia and insulin resistance (IR). The common clinical manifestation is menstrual disorder. Based on the theory of kidney governing reproduction, congenital kidney and acquired spleen complement each other，dominant treatment of menstrual regulation general is to regulating spleen and kidney. With this theory, Jia Wei Cang Fu Dao Tan Decoction is an effective prescription for the treatment of obese PCOS. These decoction could reduce androgen ，one of its mechanisms is to regulate the PI3K/AKT/mTOR signaling pathway..Lipocalin-2 (LCN-2) is a bone - derived sex hormone with metabolic regulation.This hormone is little researches in the field of PCOS. LCN-2 is the Key factors for development of PCOS-IR, but the mechanism of its effect on PCOS is not clear. This research uses Early study found that patients with PCOS-IR high serum LCN-2 expression as the foundation, with PCOS rats model as the carrier, from the level of organ, protein, to reveal how LCN-2 influence gonadal axis and insulin pathwaythe. It can be used as an important supplement to the theory of "kidney dominates bone and main reproduction". Use Sex hormones, insulin, pathology as indicators, further clarifies the mechanism of the regulation of the endocrine and metabolism of Jia Wei Cang Fu Dao Tan Decoction.

多囊卵巢综合征（PCOS）主要病理特征为高雄激素血症与胰岛素抵抗（IR）。常见临床表现为月经失调。岭南罗氏妇科基于肾主生殖理论，先后天互资，调经治法以调补脾肾为主导。该理论指导的加味苍附导痰汤是治疗PCOS-IR的效方、验方，可降雄、其降胰岛素的机理之一是调控PI3K/AKT/mTOR信号通路。. 脂质运载蛋白2（LCN-2）是具有代谢调节的骨源性激素。该激素在PCOS领域研究较少。LCN-2是PCOS-IR发展的关键因子，然而其作用于PCOS的机制尚未明确。本研究以前期发现的PCOS-IR患者血清中高表达的LCN-2为基础，以PCOS大鼠模型为载体，从器官、蛋白水平揭示PCOS中主要由成骨细胞来源的LCN-2作为新靶点如何影响性腺轴与胰岛素通路，可作为“肾主骨生髓、主生殖”理论的重要补充。以性激素、胰岛素、病理为指标，进一步阐明加味苍附导痰汤调节内分泌及代谢的机理。

多囊卵巢综合征（PCOS）主要病理特征是高雄激素血症和胰岛素抵抗（IR）。LCN-2是代谢调节骨源性激素，本研究目标通过人血清及动物模型，从器官、蛋白、基因水平，了解LCN-2与PCOS的相关性、结合部位、作用靶点，并探索加味苍附导痰汤药效及干预Akt/GSK-3β/cmyc信号通路，影响LCN-2治疗PCOS的作用机制。.本研究临床研究结论：1.PCOS患者与正常女性比较，血清LCN-2呈下降趋势；2.PCOS患者具有超重、高胰岛素血症、高雄激素血症、高尿酸血症特征者，LCN-2下降。不具有IR的瘦型PCOS患者LCN-2升高。.实验研究结论：.1.来曲唑联合高脂饲料是研究PCOS-IR的良好动物模型，具有肥胖、高雄激素血症、高胰岛素血症、卵巢多囊改变特征。.2.PCOS-IR大鼠模型中，子宫、卵巢、脂肪、肝脏和下丘脑垂体LCN-2蛋白含量下降，肌肉上升。.3.通过免疫荧光法验证LCN-2通过血脑屏障，在PCOS-IR大鼠模型中LCN-2和MC4R的结合位点在下丘脑。LCN-2过表达后呈现结合率上升表现。.4.在体大鼠LCN-2过表达与抑制剂试验，尾静脉注射与鞘内注射均不能达到拮抗效能。.5.加味苍附导痰汤药效学为降糖、降胰岛素、改善IR、促排卵和黄体生成作用，中药中剂量组为优。中药高剂量组升调LCN-2最优。.6.PI3K/Akt/GSK-3β/cmyc 信号通路作用，在靶器官卵巢、子宫、肝脏和肌肉中升调通路中的不同蛋白。AKT激动剂主要作用器官在子宫，作用靶点集中在上调GSK-3β和cmyc基因，达到上调LCN-2的作用。.骨源性激素LCN-2可作为PCOS-IR的生物标记物，不仅具有调节胰岛素分泌，增加胰岛素敏感性和糖耐量的作用，同时可通过血脑屏障，与黑皮质素4受体（MC4R）的结合位点在下丘脑，LCN-2通过骨分泌影响生殖功能的作用机理有待进一步研究，基础研究要攻克骨源性LCN-2的检测，据此提出新的研究假设：“骨-下丘脑轴”与“下丘脑-垂体-卵巢轴”交互作用是否通过LCN-2实现？为肾主骨生髓主生殖，肾-天癸-冲任-胞宫生殖轴理论提供理论初探。临床研究可考虑开展基因多态性的研究，LCN-2有控制食欲的作用，加味苍附导痰汤的作用靶点在GSK-3β和cmyc基因，达到上调LCN-2的作用，加味苍附导痰汤如何通过下丘脑起到抑制食欲的作用可作为下一步研究方向。