组织原位记忆T细胞在干燥综合征中的作用及其分子调控机制的研究

Tissue resident memory T (Trm) cells are a noncirulating subset located in local tissue and organs. Activated Trm cells secrete classical proinflammatory cytokines to recruit and activate B cells and T cells subsets in peripheral blood. Primary Sjögren’s syndrome (pSS) is an autoimmune disease characterized by lymphocytic infiltration in exocrine tissues,over effector T cells result in salivary glands destruction. We recently demonstrated that Trm cells are increased in salivary glands and are related with inflammation and autoantibody in patiens with pSS, which indicate Trm cells may participate in the pathogenesis of pSS. Trm cells expression and molecular mechanism are investigated by histochemistry, immunofluorescence and flow cytometry, and we evaluate the correlation between Trm cells and clinical features in pSS patients. Sorted effective T cells are cultured in vitro to define the principle and molecular mechanism of Trm cells differention and migration. Inhibiting or promoting the differention of Trm cells in a mice model of pSS can explore the changes in the pathology and immunological indices, verify the function of Trm cells and provide a new treatment strategy for pSS.

组织原位记忆T细胞（Trm）是一群定植于组织器官中的细胞，分泌致炎因子招募循环中的B细胞、T细胞等的细胞亚群。原发性干燥综合征（pSS）为累及外分泌腺的自身免疫病，腺体中有大量效应T细胞，导致腺体结构破坏。申请者新近发现pSS患者唇腺中Trm较健康人群明显增多，与pSS的炎症活动和自身抗体产生有关，提示Trm可能参与pSS的发病。本课题以Trm分子调控机制为切入点，通过组织病理、免疫荧光、流式细胞技术等方法确定Trm细胞的形成及功能调控作用，以及Trm的表达与临床特点相关性；流式/磁珠分选效应T细胞进行体外混合培养明确Trm分化迁移的原理及分子调控机制；最后通过动物实验抑制或促进干燥综合征模型鼠Trm形成，观察小鼠组织病理及免疫学指标的变化，从而明确Trm在pSS发病中的作用和调控机制，为治疗pSS探索新的靶标。

组织原位记忆T细胞（Trm）是一群定植于组织器官中的细胞，分泌致炎因子招募循环中的 B细胞、T细胞等的细胞亚群。原发性干燥综合征（pSS）为累及外分泌腺的自身免疫病，腺体中有大量效应T细胞，导致腺体结构破坏。本课题以Trm分子调控机制为切入点，通过组织病理、免疫荧光、流式细胞技术等方法确定Trm细胞的形成及功能调控作用，以及Trm的表达与临床特点相关性；流式/磁珠分选CD4+T细胞进行体外混合培养明确Trm分化迁移的原理及分子调控机制；最后通过动物实验S1PR1抑制剂给药处理pSS疾病模型鼠NOD鼠，观察小鼠组织病理及免疫学指标的变化。结果发现，pSS患者外周血及唇腺组织中存在Trm 前体细胞（Tem和Teff细胞）表达，同时Trm细胞可与B细胞相互作用，可能进一步加重唇腺病理的损害。而pSS患者外周血和唇腺CD4+T细胞中鞘氨醇-1-磷酸受体1（S1PR1）表达降低与淋巴细胞减少有关。此外，还揭示了在细胞因子微环境的调节下pSS 患者的CD4+T细胞S1PR1和Klf-2基因表达降低，可能会在转录水平上促进组织常驻CD4+T细胞的形成。另一方面在动物实验中发现S1PR1表达降低后NOD鼠脾脏中CD4+T细胞含量显著性降低，颌下腺CD4+T细胞含量显著性升高。因此，抑制S1PR1表达会引起NOD鼠外周组织CD4+T细胞减少，并影响颌下腺CD4+T细胞量。由此得出结论调控S1PR1的活性可能会影响腺体病灶中CD4+T细胞的浸润量，这为进一步研究减少CD4+T淋巴细胞在腺体组织中的积聚从而缓解炎症提供了分子基础和研究方向。