烟曲霉Hog1-MAPK信号途径介导应激反应的新机制及其在致病中的作用

近年来，主要由烟曲霉引起的侵袭性曲霉病（IA）的发生不断上升且病死率很高，对其致病的毒力因素研究至关重要；基于发生IA时烟曲霉对机体防御系统作出应激反应的重要性以及我们关于烟曲霉Hog1-MAPK信号通路中SHO1、PBS2等参与应激反应的重要发现，我们首先提出烟曲霉Hog1-MAPK信号通路在IA发生中具有重要作用；进而拟通过基因表达谱芯片、实时PCR和蛋白质组学技术，筛选出该通路所调控的抵抗各种应激反应的基因和蛋白；然后通过烟曲霉SHO1、PBS2基因缺陷株与吞噬细胞相互作用体系和吞噬功能缺陷的IA动物模型的建立，探讨烟曲霉Hog1-MAPK通路中SHO1、PBS2及其调控基因和蛋白对吞噬细胞杀伤的影响和在IA发生中的作用，为阐明烟曲霉侵袭性感染的机制和发现抗真菌治疗新靶位而奠定基础。

烟曲霉是引起侵袭性曲霉病的主要病原菌。本项目通过构建烟曲霉sho1、pbs2基因缺陷株、额外拷贝株以及野生株，并研究其在不同渗透压、pH、温度、ROS或抗真菌药物状态下的基因、蛋白水平的表达，明确了烟曲霉Hog1-MAPK通路主要成分sho1、pbs2在抵抗应激反应过程中的重要作用；通过体外实验，建立了树突状细胞与烟曲霉的共培养体系并检测了相应的细胞因子水平；应用透射电镜观测烟曲霉sho1、pbs2基因缺陷株、额外拷贝株以及野生株孢子形态学的变化、以及Real-time PCR方法观察sho1基因和pbs2基因对细胞极性相关的CDC42、RHO1和RHO3三基因的表达的影响，从而明确了sho1通过影响Rho GTPases的表达从而影响烟曲霉的极性生长。此外，本项目正在建立了吞噬功能缺陷的IA动物模型，评价sho1和pbs2在烟曲霉侵袭性感染中的作用。根据前期研究结果进行了延伸研究，尤其是在信号转导通路和药物敏感性方面也取得了一定的成果。本项目结果表明，烟曲霉Hog1-MAPK通路主要参与生长环境改变带来的应激反应，对小鼠的致病力影响并不明显，但是该通路及其相关通路却参与了药物的敏感性。.通过本项目的实施，目前共有12篇论文成果产出，其中9篇SCI（7篇已发表，2篇已投稿），3篇中文核心期刊（均已发表），举办学术会议1次，2项专利，1项省部级奖项，培养博士研究生9名。项目实施过程严格遵守科学准则，研究人员态度端正，实事求是，项目经费的管理及使用符合国家政策。