Rab25在卵巢癌耐药及机制的研究

卵巢癌死亡率极高，肿瘤细胞对化疗药物产生耐药严重阻碍了卵巢癌的疗效。Rab25作为Rab家族的新成员，近年发现Rab25与卵巢癌发生发展密切相关，可能参与了PI3K/AKT信号转导通路。研究证实PI3K／AKT转导途径是卵巢癌细胞对顺铂敏感性的关键调控因素，Rab25表达升高与卵巢癌的耐药相关，因此，本研究拟进一步探讨Rab25与卵巢癌耐药的机制，应用基因转染与基因沉默技术验证卵巢癌细胞系中Rab25表达水平与卵巢癌细胞化疗敏感性之间相关性，探讨Rab25对卵巢癌细胞对化疗敏感性影响及与PI3K/ AKT/mTOR信号传导通路的关系，同时建立裸鼠卵巢癌移植瘤，体内实验验证Rab25分子影响卵巢癌细胞的化疗敏感性。本研究将进一步了解肿瘤细胞产生耐药性的机理，为寻找新的肿瘤治疗分子靶点提供一定的理论依据。

研究背景 卵巢癌是死亡率极高的妇科恶性肿瘤，由于缺乏行之有效的筛查方法和早期缺乏具有特征性的症状和体征，临床上超过70％的卵巢癌患者已处于晚期，该类肿瘤患者开始时对以铂类药物卵巢为基础的化疗敏感。但是随着恶性肿瘤的不断进展，许多患者对化疗药物产生耐药，引起肿瘤复发并最终死于该病。肿瘤对化疗耐药成为有效治疗卵巢癌的重大障碍，导致了卵巢癌如此高的死亡率。提高早期诊断率、探寻行之有效的治疗方法以及强有力地遏制耐药发生的手段，一直是数十年来妇科肿瘤领域研究的热点。因此，不断加深对卵巢癌的发病以及对化疗药物产生耐药机制的研究，在传统的铂类化疗药物中添加新的药物，使化疗增敏，从而提高患者的生存率，迫在眉睫。Rab25作为Rab家族的新成员，近年发现Rab25与卵巢癌发生发展密切相关。.研究方法 本研究应用细胞培养、基因转染与基因沉默技术及药物干预体外实验验证卵巢癌细胞系中Rab25表达水平与卵巢癌细胞化疗敏感性之间相关性。.研究结果及重要数据（1）顺铂耐药的细胞系及敏感的细胞系中存在着Rab25及PI3K/AKT信号通路的差异在耐药细胞系SKOV-3 Rab25高表达，PI3K/AKT信号通路活化。(2) 在两种细胞系中存在着G1期细胞的差异 在耐药的SKOV-3细胞系中在顺铂药物作用下处于G1细胞周期的细胞数无明显变化，而两种细胞系凋亡的细胞数无异常。该结果强烈表明在SKOV-3 细胞系中顺铂诱导了G1期细胞周期抑制的缺陷导致了耐药的发生。（3）抑制PI3K/AKT信号通路可降调Rab25的表达 用10 μM PI3K/AKT 抑制剂LY294002处于SKOV-3 细胞24 and 48 h, 细胞中Rab25 mRNA表达下降大约 46.7 及 58.4%，western blot 分析进一步证实，结果表明LY294002 可以显著抑制Rab25 表达, 从而显示抑制PI3K/AKT 信号通路可降调Rab25的表达。（4）抑制PI3K/AKT信号通路或降调细胞中Rab25的表达可增加耐药细胞对顺铂药物的敏感性。