FAS参与卵巢癌耐药的机制研究

The platinum is the first line-drug in the therapy against malignangt ovarian neoplasm. The drug-resistance of tumor cells to chemotherapy severely affect ovarian cancer chemotherapeutic effect. Fatty acid synthase (FAS), the primary enzyme involved in de novo lipogenesis from carbohydrates, is expressed at low levels in most normal human tissues but is elevated in several human neoplasms.High expression of FAS is correlted to chemoresistance,but the mechanism is not clear, probable is related to Rab25/ PI3K/AKT signal transfer pathway.PI3K/AKT signal transduction pathway is the important factor to platinum sensitivity.Our previous study demonstrated that the expression of the Rab25 gene in human ovarian epithelial cancer cells had the relation of the effect of chemotherapy sensitivity and PI3K/AKT signal transduction pathway. In the present study, we used gene transfer and RNAi technology to validate relativity in the expression of the FAS gene in human ovarian epithelial cancer cells and chemotherapy sensitivity, to study the relation of the effect of chemotherapy sensitivity in human ovarian cancer cells and Rab25/ PI3K/AKT signal transfer pathway.Our data may provide certain theory groundworks for a novel therapeutic target.

铂类为基础的化疗是卵巢癌的一线治疗方案，但化疗耐药是复发转移的主要原因。FAS是体内内源性脂肪酸合成的关键酶，有研究显示FAS与卵巢恶性肿瘤化疗敏感性存在相关，但具体的机制不明，可能与Rab25通过活化PI3K/AKT/mTOR信号通路而上调细胞中FAS的表达，进而对卵巢癌细胞产生生物学效应有关。PI3K／AKT转导途径是卵巢癌细胞对顺铂敏感性的关键调控因素，我们前期研究发现，Rab25参与卵巢癌的耐药，且Rab25蛋白可激活经典的抗凋亡、促进细胞增殖的PI3K/AKT/mTOR信号通路。因此，本课题拟在此基础上，构建FAS表达载体，通过RT-PCR、western blot、凋亡、侵袭检测等分子生物学技术及裸鼠移植瘤体内实验，观察FAS对多种卵巢癌细胞生物学行为和铂类敏感性的影响，探讨FAS参与卵巢癌耐药的机制，从而为联合Rab25做为治疗卵巢癌的分子靶点的化疗方案提供理论依据。

研究背景 卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤，且死亡率较高。以铂类药物为基础的化疗是重要的辅助治疗，但肿瘤细胞对铂类药物耐药成为有效治疗卵巢癌的重要障碍。对于铂类药物耐药的机制，近年来有较多的研究。FAS在卵巢癌组织中高表达，且与肿瘤的分期及临床预后之间存在相关性。体外及体内研究表明该分子具有抗肿瘤活性。该研究进一步探讨上调卵巢癌细胞中FAS的表达与肿瘤耐药的关系。.方法 蛋白印迹实验观察卵巢癌细胞中FAS表达水平，干扰RNA生物技术降调癌细胞中FAS表达，Annexin V-FITC/PI试剂盒观察卵巢癌细胞的凋亡作用，体外细胞小室及跨膜试验研究卵巢癌细胞的侵袭及转移能力，裸鼠研究FAS对中卵巢癌肿瘤细胞的体内影响。.重要结果 1.降调卵巢癌组织中FAS可致顺铂耐药；2.下调细胞中FAS表达可促进细胞增殖，促进细胞生长周期变；3.下调顺铂耐药细胞中FAS 的表达可促进细胞凋亡；4.顺铂可促进FAS下调的细胞的侵袭及转移能力；5.下调FAS可促进癌基因MDR1,MRP2及LRP的表达；6.移植瘤裸鼠体内实验证实上调FAS 的表达可逆转肿瘤化疗耐药。.科学意义 上调卵巢癌细胞中FAS的表达，可逆转其对顺铂耐药。故卵巢癌组织中FAS可做为逆转肿瘤顺铂耐药的分子靶点。