一种新型疫苗对小鼠胶原诱导关节炎的疗效与机制研究

TNF-α是炎性疾病的关键致病因子。治疗这类疾病的重要手段，就是抑制TNF-α的活性。迄今，均使用抗TNF-α的各种单克隆抗体或TNF-α可溶性受体融合蛋白来对抗其活性，是一种被动免疫的方式，其所需的TNF-α抑制剂疗程长，使用的制剂量大，给药的间歇短。国外学者用疫苗主动免疫方法诱导机体产生抗TNF-α的中和抗体，在炎性关节炎的动物模型中得到肯定疗效，其给药的间歇长，结核感染率无明显增高，且体内TNF-α中和抗体滴度通过是否给予维持疫苗得到控制。在国外学者研究基础上，本课题拟采用小鼠TNF-α氨基端第4到23氨基酸与匙孔血蓝蛋白结合的杂络物，作为一种新型的主动免疫疫苗，在牛II型胶原诱导的自身免疫性关节炎的小鼠的类风湿关节炎模型中，观察这种主动免疫的疗效与机制。

经质谱分析和HPLC分析，用纯度达到99%的小鼠肿瘤坏死因子肽链（TNF-α氨基端第4 到23 氨基酸，C-TNF(4-23)），并与匙孔血蓝蛋白（KLH）形成C-TNF(4-23)-KLH杂络物疫苗,其安全性良好，小鼠在免疫期间一般状况良好，没有体重下降、脱毛、溃疡等现象。体外实验显示，该多肽疫苗没有细胞毒作用。在小鼠胶原纤维诱导的关节炎（Collagen-induced arthritis ，CIA）动物实验中显示，同对照组（KLH组）相比，该疫苗能够延缓小鼠关节炎的进展，对照组小鼠的关节炎呈现蔓延的趋势，而疫苗治疗组的小鼠在初次关节炎发病后，逐渐进入稳定期。对免疫小鼠的血清做抗体滴度检测，抗体的滴度随免疫次数的增加，呈现增加的趋势。在停止免疫后，抗体滴度会逐渐下降。体外实验显示，免疫组小鼠的血清能够在一定程度上中和TNF-a的细胞毒作用。.综上所述，该疫苗在小鼠类风湿关节炎模型的治疗方面安全性良好，在小鼠体内能产生一定滴度的抗TNFa抗体，该抗体能中和TNFa的细胞毒作用，对动物模型有一定的治疗效果。