全真一气汤多糖对免疫抑制小鼠肠道粘膜免疫功能的影响

中药多糖的免疫增强或调节作用已有大量研究，但由于多糖不易被吸收，使其作用受到质疑，而现代粘膜免疫研究成果为研究这些成份作用机制提供了可能，即粘膜局部免疫变化可以通过细胞归巢和免疫分子影响整体免疫。故本项目选取临床疗效确切的全真一气汤，提取其多糖成分，设立灌服和腹腔注射两种给药途径，通过观察全真一气汤复方多糖对肠道粘膜和整体免疫功能的影响，探讨肠道粘膜作为中药多糖免疫药效作用靶点的可能性，并初步阐明多糖是否可通过作用肠道粘膜免疫系统进而影响整体免疫功能，从而有助于加深对全真一气汤"益气健脾补肾"作用的现代理解，也为类似中药多糖作用靶点的研究奠定基础。

目 的.1、探讨全真一气汤多糖的提取纯化工艺；.2、建立鼠免疫功能低下的实验模型；.3、通过观察免疫抑制小鼠整体免疫功能变化及肠道黏膜免疫，探讨全真一气汤复方多糖提高免疫抑制小鼠机体免疫功能的可能机制。 .方 法.1、考察脱蛋白、除色素对纯化工艺的影响，并比较超滤法和透析法的优劣。.2、SPF级BALB/C雄性小鼠20只，随机分为2组①模型组（n=10）：腹腔注射环磷酰胺（CY）100mg/kg；②正常对照组（n=10）：注射等量生理盐水。24H后处死动物，A.计算胸腺、脾脏指数。B.计数小肠Peyer’s结的数量，测量其大小，并计分。C.检测外周血白细胞及淋巴细胞数目。.3、取SPF级BALB/C雄性小鼠28只，随机分为4组：①正常对照组(Z)②模型组(M)③QZYQPS灌胃组(GW)④QZYQPS腹腔注射组(ZS)。.4、分别检测脏器指数、Peyer’s计分和外周血白细胞及淋巴细胞计数；血清溶血素及IL-2浓度；小鼠迟发型变态反应（DTH）实验；胸腺、脾脏等凋亡基因Bcl-2 、Bax的含量及肠道SIgA的含量。.结 果.1、经过透析法精制后多糖含量高于超滤法，多糖含量可达87.63±0.97%；.2、模型组脏器指数降低，Peyer’s结计分较正常组比较减少，外周血白细胞及淋巴细胞数目均明显降低。对比正常组有统计学意义（p<0.05）；.3、GW组、ZS组的脏器指数、派氏结计分、外周血白细胞数目及淋巴细胞数目均较M组高（p<0.05）；GW组、ZS组的血清溶血素含量及IL-2浓度较M组高（p<0.05）；GW组、ZS组的耳肿胀率较模型组高（p<0.05）；.4、GW组、ZS组胸腺、脾脏、小肠绒毛与M组比较Bcl-2 含量升高、Bax的含量减低（p<0.05）；GW组、ZS组的肠道SIgA的含量较模型组增加（p<0.05）。.结 论：.1、脱蛋白、除色素工艺对于精制过程有较大的影响，优化后提取工艺：水提→醇沉→酶法脱蛋白→大孔树脂除色素→透析；.2、QZYQPS可对抗免疫抑制小鼠免疫器官重量、外周血白细胞及淋巴细胞数目的降低，提升外周血血清IL-2浓度，同时也提示多糖口服给药免疫活性强于腹腔注射给药。.3.QZYQPS口服及注射有对抗CY致小鼠免疫器官凋亡的作用，其可能机制是通过提高bcl-2和降低bax的表达而实现的。