DNA结合抑制因子3-E2A二聚体调节Th17细胞和Treg细胞分化参与原因不明复发性流产机制研究

Abnormal immunity is the important reason for unexplained recurrent spontaneous abortion (USRA). The role of Th17 、Treg cells in the development of USRA has been confirmed in previous study, but it’s poorly understood as to the generation regulation and action mechanism of Th17、Treg cells. Inhibitor of DNA binding-3 plays an important role in the differentiation of Th17 cells, which is regulated by E2A. This project will study the regulation effect of Treg and Th17 differentiation in the unexplained recurent spontaneous abortion by using the gene regulation 、RT-PCR, Western blot and immunoprecipitant, to change the expression of Id3. We further explore that whether Id3 regulates the differentiation of Th17 and Treg cells through the effect with transcription factor E2A which can be formed homodimer to influence the transcription of RORγt and Foxp3 or not.shRNA block or enhance the expression of Id3, E2A to observe the effect of Th17 and treg on USRA. This study is aimed at exploring the mechanisms Id3-E2A regulating Th17 cell and Treg cell invovled in URSA and providing a more comprehensive immunlogical therapy for URSA.

免疫学异常是导致原因不明复发性流产（USRA）发生的重要原因。本课题组的前期工作已证实Th17、Treg细胞参与了USRA的发生与发展，但是对于URSA发生过程中，Th17细胞、Treg细胞如何生成,调节以及发挥作用的机制尚不明确。DNA结合抑制因子3（Id3）在Th17细胞、Treg细胞分化中起到重要的调节作用，并受到E2A调控。本课题拟通过本室已建立的USRA研究的体内、体外模型，采用RT-PCR、western blot、启动子分析、染色质免疫共沉淀以及过表达、RNA干涉等方法，重点探讨Id3是否通过与转录因子E2A作用，形成非DNA结合型二聚体，影响RORγt和Foxp3转录，进而调控Th17和Treg细胞分化而影响URSA的发生，以期阐明Id3-E2A二聚体调节Th17细胞和Treg细胞分化参与URSA的机制，为临床治疗URSA提供新的更全面的免疫治疗策略。

本项目执行年限为三年，所有研究内容基本按计划完成。具体完成情况如下：.2015 年2月-2015 年6月构建小鼠流产模型及正常对照模型；.2015 年7月-2016 年8月收集RM和RIF患者及正常对照组（育龄女性）子宫内膜标本，完成了1篇论文的撰写；.2016年8月-2017年12月检测小鼠标本和人体标本中Id3、E2a、Foxp3、CTLA-4、CD34等指标的表达情况，并分析其相关性。完成论文的撰写。.本研究内容旨在说明以下两个问题：.1.1 Id3表达改变通过影响血管形成过程，参与了RM和RIF的发生；.2.2 E2a表达改变通过影响Treg细胞的数量及功能，参与了RM和RIF的发生。.获得的主要成果如下：1.发表两篇SCI收录论文，1篇发表于国内核心杂志；2.培养研究生1名；.3.已取得的成果：本项研究结果参与申报第二届妇幼健康科学技术奖及湖北省2017年度科技进步奖，并获得第二届妇幼健康科学技术奖二等奖及湖北省2017年度科技进步奖二等奖（本人排名分别为第8，第9）。部分数据已完全整理好并撰写英文及中文学术论文各一篇，英文拟投SCI收录的杂志，中文拟投《中华生殖与避孕杂志》。